农林领域快速发表文献的蹊径--蛋白质后修饰表达谱
蛋白质后修饰(Protein Post-translational Modification, PTM)是蛋白质行使功能的最高级形态,也是信号通路调控、表观遗传的核心内容。同时,作为农林领域研究的战略前沿,蛋白质后修饰的相关研究也是快速发表SCI文章的蹊径。今天我们讲座的内容主要针对最简单、最快速、经费最低的功能蛋白质修饰表达谱解析(定性研究)作为切入点,系统讲解对某一物种、某一领域进行蛋白质后修饰做开创性、奠基性修饰研究的原理、流程及SCI案例分享。
APT多组学联合分析强势来袭—转录蛋白联合搞事情
中心法则告诉我们遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质。但是基因表达仅仅是从转录组到蛋白质组的单向流动吗?两者表达量是一一对应的吗?为什么两者联合分析的文章竟然火箭式的增长?为什么辣么多的研究方向都用到这个联合分析? 想知道这些答案,欢迎大家准时收听本次中科新生命的在线讲座。
获得高品质重组蛋白的实验方案以及经典案例分析
重组蛋白是应用重组DNA技术获得的蛋白,除了在基础科学研究,包括:蛋白结构分析、蛋白功能研究、细胞培养等方面有十分重要的作用,随着近年来大分子药物(蛋白药物和单克隆抗体药物)成为制药行业发展速度最快的领域之一,重组蛋白在大分子药物研发中也占据着关键性的位置。因此,要获得高纯度、活性接近天然蛋白的重组蛋白尤为重要。 这次的交流会,会针对目前常见的几种表达系统在研发重组蛋白的过程中遇到的问题进行具体的案例分析,包括:表达系统选择、载体、表达片段、培养条件、纯化等多方面方法的改进,以获得高质量重组蛋白样品。
蛋白质氨基酸修饰的发现和生理意义研究
氨基酸是细胞信号和代谢的重要调控因子。氨酰tRNA合成酶(ARS)和它所对应的氨基酸通常有着类似的调控功能。我们发现每个ARS可以催化形成相应的蛋白质赖氨酸上的氨基酸修饰并且传递氨基酸的信号。在细胞里,氨基酸可以促进ARS和它的底物蛋白的相互作用,从而促使ARS将活化的氨酰-腺苷酸(氨酰-AMP)结合到底物蛋白的赖氨酸的侧链氨基上形成氨基酸修饰。氨基酸修饰可以被去乙酰化酶SIRT家族去修饰,特别是SIRT1和SIRT3。说明了去氨基酸修饰和去乙酰化修饰可能有着类似的机理。mTORC1 信号通路中的关键蛋白RagA/B 的142位赖氨酸(K142)上的可逆的亮氨酸修饰可以调控mTORC1信号通路的活性。细胞凋亡信号通路中的关键蛋白caspase9的 409/410位赖氨酸(K409/410)以及 ASK1 的688位赖氨酸(K688)上的谷氨酰胺修饰可以抑制细胞的凋亡。总的来说,我们发现了ARS的不同于蛋白质合成的新的催化活性,以及细胞内氨基酸信号的感知和传递的机制,并为氨基酸和ARS的调控功能提供了新的机理解释。 关于【第一作者讲坛】: CST十分重视为科学家的成就喝彩,为科学家的成长赋能。自2008年进入中国起,就和中国细胞生物学学会、中国细胞生物学学报等合作,先后冠名或设立终身成就奖、杰出成就奖、优秀青年研究员奖、优秀论文奖、CST卓越创新转化奖、细胞生物学科学研究优秀人才奖/科研新秀奖,第九届厦门学术会议-CST最佳墙报奖等。 近几年,随着中国科研水平的提升,很多包括80后,90后在内的青年学者已经在国际学术舞台上崭露头角。为了给青年学者提供更自由开放的展示学术成果的机会,促进科研工作者更有效的学术交流,CST在生物谷行云学院开创“第一作者讲坛”。“第一作者讲坛”将邀请已发表有影响力的同行评阅论文的国内外青年才俊,讲述自己的科研故事,促进科研思路的交流,创新技术的探讨。“第一作者讲坛”希望通过“第一作者”的亲历自述,启发更多科研工作者的创新发现。
重组蛋白不同规模生产线介绍
义翘神州拥有超过十年的重组蛋白生产研发经验和领先的制备工艺,已成功表达超过7000种蛋白,每年新增蛋白种类在1000种以上,建立了全球规模最大的重组蛋白库。义翘神州建立了五大蛋白表达系统,即原核蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达系统、HEK293/CHO细胞瞬时表达系统、HEK293/CHO稳定细胞株表达系统,以及多条GMP生产线。并拥有几十套精准检测设备,以及严格的QC质检体系。义翘神州还提供从基因合成、载体构建到蛋白表达及纯化的一站式重组蛋白表达服务。
高通量蛋白芯片使用介绍
蛋白芯片有多种检测应用,比如蛋白-蛋白相互作用、抗体特异性鉴定、自身免疫抗体筛查、药物-靶点相互作用等。本视频以最具代表性的抗体-蛋白相互作用展示芯片基本操作方法,以LucidArray-P人CD分子蛋白芯片试剂盒为例,用于检测CD分子蛋白芯片的灵敏度,以梯度稀释CD40L R307兔单抗为样本,完成实验并扫描分析,绘制标准曲线,从而确定CD40L抗体检测浓度的线性范围。
膜蛋白和线粒体蛋白组学在医学研究中的应用
膜蛋白即生物膜所含蛋白,主要参与信号识别和传递、物质运输、细胞粘附和酶促反应等。大约有30%的基因编码膜蛋白质,其中50%是目前已知的药物靶点。通过对膜蛋白质进行分离、质谱鉴定和定量,对进一步阐释生命机理、寻找疾病标志物、筛选药物靶点及毒理学研究具有重要意义。 线粒体是真核细胞内重要的细胞器,除参与能量代谢外,还与多种生理、病理活动密切相关,如退行性疾病、衰老、癌症等。运用蛋白质组学技术,研究不同生理和病理状态下线粒体蛋白的变化趋势和相互关系,为线粒体相关疾病的诊断和治疗提供重要的标志物和药物作用靶点。
Oxoid植物源蛋白胨用于发酵工艺的培养基优化
随着工艺、法规等要求不断提高,越来越多的生物制药项目开始要求使用非动物源培养基原料进行开发和生产。那Oxoid植物源培养基产品在这方面有哪些特色?用于发酵工艺的培养基优化时又有哪些点需要考虑?我们一起来看看吧。
牛奶或 BSA?为 WB 选择一种封闭蛋白
本视频对比BSA和牛奶具体区别,并推荐牛奶作为最合适的封闭试剂,包括磷酸化靶点。正确的试剂选择,为您的WB实验保驾护航。
基于CR3520 cIEF-MS的尿白蛋白分析及其临床应用研究
膜性肾病(MN)是全世界原发性肾小球疾病的最常见原因之一。M型磷脂酶A2受体(PLA2R)被证明是一类非常有效的生物标志物,在70%以上的特发性膜性肾病(IMN)病例中表达,现已被广泛的应用于临床诊断。但是PLA2R在区分原发与继发MN上表现不佳。 本研究在此前尿蛋白检查的基础之上,采用CR3520毛细管等电聚焦质谱法(CR3520 cIEF-MS)对原发性和继发性MN患者的尿白蛋白进行了表征。 本研究发现尿白蛋白的种类在不同的MN患者尿中存在显著差异,这一差异在膜性肾病亚型分型中具有潜在的应用前景。 此外,使用CR3520 cIEF-MS进行尿蛋白分析也将有益于许多其他类型的肾脏疾病(例如慢性肾脏病,糖尿病肾病等)病理,预后和诊断的研究。