流式细胞术实验精要及其在癌症研究中的应用
流式细胞术发展于20世纪60年代,是一种可以对细胞或者亚细胞结构进行快速分析和分选的技术。具有检测速度快、检测参数多、灵敏度高、可定量、可分选等优势,是一项综合了激光技术、计算机技术、流体力学、生物学技术等多领域成果的高科技方法,在生物学、临床医学、药物学等多领域有着广泛的应用。
气质联用技术在呼吸气无创诊断研究中的应用
随着社会发展脚步的加快,人们生活水平的不断提升,我们对个人健康的关注度也在提升,防控、预防是最经济有效的健康策略。近年来,恶性肿瘤和慢性呼吸系统疾病的发病率呈现逐年攀升的态势,严重影响了人们的健康和生活质量,这类疾病的早期筛查和诊断是降低其发病率与死亡率、提高人们生存质量的重要手段。质谱作为临床检测新技术,在生命组学、精准医疗以及临床医学研究中发挥着重要作用。与传统侵入式诊断方法学相比较,利用气相色谱质谱联用技术开展的非侵入式研究方向,通过对呼气中靶标物质的检测研究,即可更加快速,高通量、对患者无创伤的情况下给出更为准确的诊断结果。作为早期癌症筛查的方式,预期每年将挽救10万人的生命,节省百亿人民币的医疗资源。本次讲座主要包含: 1、气相色谱质谱联用技术在呼吸气诊断研究中的优势 2、气质联用技术在呼气诊断研究中的筛查流程和应用
如何使用流式分析胞内信号通路转导的激活
流式细胞术(Flow)可借助翻译后修饰(包括磷酸化)特异性抗体,检测细胞内信号转导的状态。你可以设计抑制剂、激动剂或拮抗剂来调节样本中的信号活动的实验,测试可能在模型系统中起作用的信号机制。该视频将介绍成功的流式实验的五个技巧。
基于CR3520 cIEF-MS的尿白蛋白分析及其临床应用研究
膜性肾病(MN)是全世界原发性肾小球疾病的最常见原因之一。M型磷脂酶A2受体(PLA2R)被证明是一类非常有效的生物标志物,在70%以上的特发性膜性肾病(IMN)病例中表达,现已被广泛的应用于临床诊断。但是PLA2R在区分原发与继发MN上表现不佳。 本研究在此前尿蛋白检查的基础之上,采用CR3520毛细管等电聚焦质谱法(CR3520 cIEF-MS)对原发性和继发性MN患者的尿白蛋白进行了表征。 本研究发现尿白蛋白的种类在不同的MN患者尿中存在显著差异,这一差异在膜性肾病亚型分型中具有潜在的应用前景。 此外,使用CR3520 cIEF-MS进行尿蛋白分析也将有益于许多其他类型的肾脏疾病(例如慢性肾脏病,糖尿病肾病等)病理,预后和诊断的研究。
毛细管区带电泳-质谱技术应用于自下而上蛋白质组学研究
研究蛋白质组在不同生物状态下的动态变化对于阐明蛋白质在疾病发生与发展过程中的作用极其的重要。基于质谱的自下而上蛋白质组学方法已经被广泛的应用于各种生物问题的研究。在线反相色谱质谱(RPLC-MS)一般是蛋白质组学研究的首选技术。目前,基于RPLC-MS的自下而上蛋白质组学方法并不完美, 还有一些技术挑战亟待解决。 首先,大规模的准确的区分蛋白质变体 (protein isoforms) 非常困难,因为大多数蛋白质的鉴定仅仅是依赖于有限的几条肽段。进一步改进肽段分离的峰容量有望改善蛋白质变体的表征。其次,单细胞蛋白质组分析极具挑战,因为目前的RPLC-MS技术的灵敏度还相差甚远。发展更高灵敏度的蛋白质组学方法势在必行。毛细管区带电泳质谱技术(CZE-MS) 被认为是另一个自下而上蛋白质组学的重要工具,因为它可以实现高效的肽段分离以及高灵敏度的肽段检测。 在此次演讲中,将介绍应用新型超低流速鞘流液接口和离子源(深圳市永道致远科学技术有限公司CMP Scientific品牌EMASS-II ion source)的CZE-MS技术而开发的蛋白质组学方法,并对蛋白质组学的历史及其主要挑战和机遇,对如何提高CZE-MS对蛋白质组学的灵敏度和峰容量的方法进行讨论,和对基于CZE-MS的蛋白质组学的未来发展方向进行一些思考。
毛细管区带电泳-质谱技术应用于自下而上蛋白质组学研究
研究蛋白质组在不同生物状态下的动态变化对于阐明蛋白质在疾病发生与发展过程中的作用极其的重要。基于质谱的自下而上蛋白质组学方法已经被广泛的应用于各种生物问题的研究。在线反相色谱质谱(RPLC-MS)一般是蛋白质组学研究的首选技术。目前,基于RPLC-MS的自下而上蛋白质组学方法并不完美, 还有一些技术挑战亟待解决。 首先,大规模的准确的区分蛋白质变体 (protein isoforms) 非常困难,因为大多数蛋白质的鉴定仅仅是依赖于有限的几条肽段。进一步改进肽段分离的峰容量有望改善蛋白质变体的表征。其次,单细胞蛋白质组分析极具挑战,因为目前的RPLC-MS技术的灵敏度还相差甚远。发展更高灵敏度的蛋白质组学方法势在必行。毛细管区带电泳质谱技术(CZE-MS) 被认为是另一个自下而上蛋白质组学的重要工具,因为它可以实现高效的肽段分离以及高灵敏度的肽段检测。 在此次演讲中,将介绍应用新型超低流速鞘流液接口和离子源(深圳市永道致远科学技术有限公司CMP Scientific品牌EMASS-II ion source)的CZE-MS技术而开发的蛋白质组学方法,并对蛋白质组学的历史及其主要挑战和机遇,对如何提高CZE-MS对蛋白质组学的灵敏度和峰容量的方法进行讨论,和对基于CZE-MS的蛋白质组学的未来发展方向进行一些思考。
Hi-c技术在医学领域的应用
Hi-C是高通量染色体构象捕获(High-throughput Chromosome Conformation Capture, Hi-C)技术的简称,是由美国Job Dekker研究团队于2009年开发,最初用于捕获全基因组范围内所有的染色质内和染色质之间的空间互作信息,经过近几年的飞速发展,现已应用于基因表达的空间调控机制研究、构建染色体水平参考基因组、构建单体型图谱等方向。在后基因组时代,基因组学研究已全面进入3D时代。
Hi-c技术在微生物中的应用
Hi-C是高通量染色体构象捕获(High-throughput Chromosome Conformation Capture, Hi-C)技术的简称,是由美国Job Dekker研究团队于2009年开发,最初用于捕获全基因组范围内所有的染色质内和染色质之间的空间互作信息,经过近几年的飞速发展,现已应用于基因表达的空间调控机制研究、构建染色体水平参考基因组、构建单体型图谱等方向。在后基因组时代,基因组学研究已全面进入3D时代。
单细胞分析主题之ICP-MS/MS创新应用网络讲座
题目一:《ICP-MS在单细胞水平金属相关分析研究应用新进展》 在单细胞中金属及其形态(聚集态)分析领域以下几个方面的研究进展: 1.基于流式进样,采用时间分辩ICP-MS对单细胞(Hela)铬形态Cr(III)和Cr(VI)的摄取进行研究及其胞内分布进行分析; 2.通过采用一种三维微交叉液滴发生系统与时间分辨ICP-MS在线联用系统,对单个细胞对金纳米粒子的摄取及胞内分布进行测定,从而揭示了MCF-7细胞在摄取金纳米粒子时存在的明显异质性研究的进展; 3.借助流体的惯性效应,通过平面和三维螺旋通道-惯性流辅助,操控粒子的运动路径,从而实现单细胞/颗粒排列,以及高通量单细胞进样。结合ICP-MS对单细胞对金属纳米粒子的摄取及分布进行研究和分析。 题目二:《ICP-MS在人体细胞多元素分析中的应用》 近年来,国内外有很多学者采用ICP-MS技术进行生物体中单细胞的分析,利用ICP-MS对于超痕量元素的检测能力,对于单个细胞中的特定元素进行有效的定量和研究。S和P作为生物体细胞中的重要元素组成,在进行ICP-MS分析时受到严重的多原子离子干扰,本报告采用ICP-MS/MS技术,利用该仪器两级串联质谱的质量筛选功能,以及多元素同时扫描的方式,分别对大鼠红细胞以及人体细胞中的S和P进行测试,通过与商品化细胞的参考值进行比对,证明了该方法对于定量单细胞中的元素含量具有良好的准确性。