Cruiser™——基因敲除检测的利器!快速找到阳性克隆!
Cruiser™ 酶,它是一种具天然强活性的核酸内切酶,与 CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点,并从突变位点的 3'-端高效地切割异源双链 DNA。
吉锐生物根据 Cruiser™ 酶的特性,自主研发出了两款产品:Cruiser™ 基因敲除检测试剂盒和Cruiser™ Enzyme。能简便高效的检测基因敲除效率和基因多态性,广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因敲除情况,尤其适用于 ZFN、TALEN 和 CRISPR/Cas9 实验中混合样本的突变效率的检测以及阳性克隆的筛选。
成体干细胞基因修饰策略及应用基础研究
成体干细胞包括造血干细胞(HSC)、间充质干细胞(MSC)、内皮祖细胞等多种类型,在多种疾病的治疗的治疗中具有广阔的应用前景。但是,成体干细胞临床应用依然存在植入效率低、功能不显著等问题。干细胞治疗通过组织重建以及分泌生长因子等综合机制发挥治疗作用。利用特定功能的基因修饰有望提高成体干细胞的治疗效果。
重组腺病毒是应用最广泛的基因转移载体,但部分干细胞缺乏其受体CAR,因而其感染效率很低。另外, 腺病毒载体携带外源基因的容量有限。为提高重组腺病毒载体修饰成体干细胞的效率及治疗效果,我们进行了一下工作:
(1)重组腺病毒载体的改构: 对5型腺病毒载体的纤维顶球进行了改造,将其替换为B组11p型腺病毒(Ad11p)的纤维顶球,从而改变了它的靶向性,增强了对造血细胞的感染效率;改构腺病毒通过CD46介导而实现对血液细胞的感染;通过和甲病毒的融合,提高重组腺病毒携带外源基因的容量及表达效率;构建了外源基因非整合于基因组的重组腺病毒载体。
(2)成体干细胞基因修饰提高存活及植入效率。鞘氨醇激酶(SPK)是一种具有抑制细胞凋亡作用的信号分子,其产物S1P对干细胞具有广泛的调控作用。SPK基因修饰可以明显提高骨髓MSC胞内SPK酶活性并促进细胞的存活和归巢,表明SPK基因修饰是提高MSC应用效率的有效策略。
(3)肝细胞生长因子(HGF)基因修饰干细胞特性及应用。生长因子的基因修饰也是增强干细胞治疗效果的重要措施。肝细胞生长因子(HGF)是一种具有促进肝再生、血管生成和抑制纤维化等多种功能的生长因子。在实验动物模型中,HGF基因修饰的骨髓MSC对心肌缺血、放射性肺损伤、肝脏损伤、股骨头坏死等损伤性疾病具有较好的治疗效果。成体干细胞基因修饰能够提高干细胞对疾病的治疗效果,并在多种疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
畅谈基因组学与人类未来
DNA晶体,这个星球上形成的每个生命,包括昆虫、细菌、植物、动物、人类、政治家,都是由DNA编码的。单个DNA晶体,而目前我们对它的研究才刚刚开始起步,这项研究将给我们带来前所未有的振奋。将是目前为止我们所参与的最伟大的项目,如果你认为绘制美国地图,登陆月球或类似项目影响深远,那么你错了,实际上我们每一个人以及每种植物,昆虫,细菌的基因图谱才是最具意义的,它能告诉我们进化史。
你的细胞中有320亿对碱基,见证你在过去10几亿年的历史,我们开始从事各种研究,我们开始改变药物,开始考古,你会发现大约700年前,欧洲白人和非洲黑人有显著差异,欧洲白人受鼠疫侵袭,大部分人死去,但仍有一小部分人存活下来,因为这些人CCR5受体上有一个基因发生突变,突变基因传给了他们的后代,只有他们存活下来,繁衍出后代,所以说的当时鼠疫造成了很大的人口选择压力,只有拥有突变基因的人才能存活。在非洲,因为没有这群人,就不存在造成人口选择压力的CCR5突变基因,这大概是700年前的事,CCR5突变基因也是艾滋病非洲大陆迅速蔓延,而在欧洲却没有那么快的原因之一,我们现在刚刚开始研究这个基因对疟疾、镰刀状细胞以及癌症的作用,因此我们开始绘制人类基因图谱,这绝对是一个前无古人的伟大项目。
50年前,正是沃森和克里克发现了DNA结构,现在还是来讨论目前最新的物种世界吧,你们都听说过DNA及其作用,我们发现一项有趣的事情,地球上这个物种最丰富,你也许认为你最强大或是蟑螂最强大,实际上肋球藻属才是最强大的,地球上有十万亿兆多个,而我们却不知道有这么多肋球藻属,这是为什么物种的基因测绘项目如此重要的一部分原因,我们才刚刚开始知道,我们来自哪,我们是什么,我们发现了变形虫,这是放射变形虫,放射变形虫之间并不相像,而我们每个人都有32亿字母(A,T,C,Gs),这些字母组成了你,这是就你细胞里的遗传密码而言,微小的变形虫,生活在水中,可能有数百只,数百万只或是数十亿只,变形虫细胞里有6200亿碱基对组成的遗传密码,也就是说他的基因组数量是你的200倍,如果你正关注有效的信息存储机制,芯片可能还打不到你的要求,但变形虫可以。我们正对生命进行研究,研究其运作机制。
基因修饰DC的抗肿瘤效应
蝙蝠基因的秘密
在西方社会,蝙蝠经常被看作是令人毛骨悚然的,甚至是邪恶的。动物学家艾玛·绨凌鼓励我们重新思考我们看待蝙蝠的方式,它们奇特而让人着迷的生物性可以让我们洞察人类自己的基因构成。
抗体治疗癌症的现在和未来:全长抗体基因疗法前瞻
癌症病人接受手术后,血液中会出现从肿瘤脱落的循环肿瘤细胞(circulating tumor cell)。循环肿瘤细胞就好像肿瘤种子,可以随着血液循环到身体其他部位,发育成新的肿瘤。
通过监督循环肿瘤细胞的数量和踪迹,医生就能提早发现病人会不会再度患上癌症,也能了解化疗或其他治疗是否对病人产生效果。
吸烟与肺癌基因
Nuture和Nature Genetics杂志的相关报道证明肺癌风险携带者普遍存在,尽管这三篇论文对于肺癌和尼古丁的关系是直接相关合适间接相关存在争议。来看看这个研究,Stephen Chanock, David Hunter和Kari Stefansson来讨论你的基因在尼古丁对于肺癌风险中的影响。
核酸质谱分析技术在基因组学,肿瘤研究及转化医学中的应用
通过监督循环肿瘤细胞的数量和踪迹,医生就能提早发现病人会不会再度患上癌症,也能了解化疗或其他治疗是否对病人产生效果。
基因编辑核酸酶
基因编辑核酸酶能改变机体基因组的定向性和精确性。这为基因功能研究和疾病治疗提供了一种新的可能性。基因编辑核酸酶在20世纪90年代中就开始了,作为一种锌指结构核酸,最新的TAILEN的发现引起了新的热潮。本视频中,Nature Methods技术编辑Monya Baker解释了基因编辑核酸酶是如何工作的,以及它是如何被选为年度方法。