mRNA技术新突破！Nat Commun：mRNA纳米脂质粒让艾滋病“潜伏的敌人”无处可逃

创新递送系统的开发：

首先，研究团队对脂质纳米粒（LNP）的组成进行了优化。他们将传统的patisiran LNP中的离子化脂质DLin-MC3-DMA替换为SM-102，并引入天然胆固醇类似物β-谷甾醇，从而开发出了LNP X。这种新型脂质组合显著增强了mRNA的递送效率，同时降低了细胞毒性。实验结果显示，LNP X在无需预刺激的情况下，对静息CD4⁺ T细胞的转染效率高达76%，远高于传统patisiran LNP的2.1%。此外，LNP X在刺激后的CD4⁺ T细胞中的转染效率更是达到了75%以上，即使在低剂量下也能实现高效的转染。

逆转HIV潜伏的实验验证：

研究人员将编码HIV Tat蛋白的mRNA封装在LNP X中，以验证其激活HIV转录的能力。Tat蛋白是HIV转录的关键调节因子，能够促进病毒RNA的合成。实验结果显示，Tat-LNP X处理的CD4⁺ T细胞中，HIV相关基因的表达显著增加，包括转录起始、延长、完成和剪接等各个阶段的HIV RNA转录本均被显著上调，而对照组的mCherry-LNP X则没有观察到这种效果。此外，Tat-LNP X还能诱导HIV病毒颗粒的释放，表明其能够有效逆转HIV的潜伏状态。

CRISPR激活系统的递送潜力：

除了Tat蛋白mRNA，研究人员还利用LNP X封装并递送了CRISPR激活系统（CRISPRa）。CRISPRa系统由催化失活的Cas9蛋白（dCas9）与转录激活域融合而成，能够特异性地激活HIV启动子区域的转录。实验结果显示，LNP X能够成功递送CRISPRa系统，并在CD4⁺ T细胞中诱导HIV相关基因的表达。与预期一致，CRISPRa-LNP X处理的细胞中HIV RNA的表达显著增加，而对照组的scramble CRISPRa-LNP X则没有这种效果。

研究的局限性与未来展望：

尽管LNP X在逆转HIV潜伏方面展现了巨大的潜力，但研究也存在一些局限性。例如，单一剂量的Tat-LNP X虽然能够显著增强HIV转录，但并未导致病毒介导的细胞毒性或免疫介导的清除作用。这提示可能需要结合其他干预措施来增强感染细胞对死亡的敏感性或促进其清除。此外，LNP X在体内的免疫原性、生物分布和半衰期等特性仍需进一步探究，以确定最佳的治疗剂量和安全性。

综上所述，这项研究通过开发高效的mRNA-LNP递送系统（LNP X），为逆转HIV潜伏状态提供了新型策略。LNP X不仅能高效递送治疗性mRNA至静息CD4⁺ T细胞，还展现了在复杂RNA递送方面的巨大潜力。未来，随着科学家们对LNP X的进一步研究和优化，我们有理由相信，这一技术有望为艾滋病的治愈带来新的突破，让“潜伏的敌人”无处可逃。（生物谷Bioon.com）