粘着蛋白的发现和表征 - Mary Beckerle P2
本视频由科普中国和生物医学大讲堂出品
Mary Beckerle (University of Utah) Part 2: Discovery and Characterization
In the second segment, I describe the identification of the focal adhesion protein, zyxin, by my lab. Recent work revealed that zyxin is down-regulated upon expression of the Ewing sarcoma oncoprotein, EWS-FLI. Loss of zyxin expression results in enhanced cell motility and is also associated with failed apoptotic signaling. Evidence that zyxin shuttles between focal adhesions and the nucleus is presented. The impact of reduced zyxin expression on tumor progression is discussed. See more at http://www.ibiology.org
蛋白免疫印迹杂交
蛋白免疫印迹杂交用来鉴定电泳分离的样品中是否存在某特定蛋白。样品通过聚丙酰胺凝胶电泳，也称SDS-PAGE得到分离后，再通过凝胶转移将蛋白质从聚丙酰胺凝胶转移到一张膜上，这样可将蛋白质固定在其特定的分离位置。接下来，用抗体对膜进行杂交，这一过程称之为免疫杂交。免疫杂交是通过抗体与目标蛋白、以及抗体与抗体之间特定识别位点的结合来实现，它的高特异性使得可以鉴定单一蛋白。对抗体的识别则用含酶的报告系统来完成。酶结合在抗体的末端，与底物起反应产生颜色或者光的变化。这些信号会被捕捉成像，并可用光密度计量学对其进行定量。
本视频文章将通过讲解凝胶转移，抗体识别和图像分析来全面介绍蛋白免疫印迹技术。将重点讨论凝胶转移步骤中的关于如何搭建转移三明治和凝胶转移条件、以及抗体结合与抗体识别的基本原理。我们还将举例说明该技术的广泛应用，包括检测蛋白质之间的相互作用和在蛋白复合物中鉴定单个蛋白。
下载生物谷APP，观看行云学院视频，让播放更流畅，使用更快捷！
生物谷APP，每天都有新资讯，每天都有好视频！
官方下载地址：http://www.medsci.cn/m/
用SDS-PAGE技术分离蛋白
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，也称SDS-PAGE，是一种被广泛使用，仅根据分子量大小来分离蛋白质混合物的技术。阴离子去污剂SDS，在变性的线性蛋白表面沿长度均匀分布使其带电。将它们上样到聚丙烯酰胺凝胶后，施加电压，这些表面覆盖SDS的蛋白将被分开。电场作为驱动力，牵引SDS结合的蛋白朝阳极移动，分子量大的蛋白将比小的蛋白移动慢。为了判断蛋白的大小，已知分子量大小的蛋白质标准也会和样品一起上样并在同等条件下跑胶。
本短片介绍SDS-PAGE技术,首先将解释其背后的原理，然后演示每一步的操作过程。视频还将讨论实验中的各种参数，如聚丙烯酰胺浓度，和用于跑胶的电压。还会介绍电泳之后的考马斯亮蓝和银染色方法，以及其他电泳技术，如双向凝胶电泳。
白宫科学研究员如何影响政府决策
Dr. Fletcher describes his experience of spending a year in Washington D.C. as a White House Fellow. He discusses the role of science in policymaking and addresses the question of how scientists can be effective in influencing decisions in government.
微管蛋白的发现
More than 40 years after Gary Borisy was a graduate student in Ed Taylor's lab, they reminisce about the events that led to the discovery of tubulin, the protein building block of microtubules. Entertainingly, their recollections don't always match.
未折叠蛋白反应的发现
Proteins that are secreted from the cell or inserted into the plasma membrane, transit through the endoplasmic reticulum where they are properly folded and assembled and may undergo post-translational modification. Walter tells the story of the exciting discovery made in his lab of the "unfolded protein response", a feedback pathway that ensures that the cell makes enough ER to properly modify all the secreted proteins in the cell.
肌球蛋白和驱动蛋白的探索发现之旅
Vale explains how doing science often follows a winding path with unexpected, sometimes wonderful surprises, and uses his own story to illustrate his point. When Vale was a graduate student, he initially hoped to show that myosin was involved in axonal transport, but ended up discovering a new molecule which he called kinesin.
GE：2016第一弹之蛋白样品制备
蛋白样品制备是进行样品分析前的第一步，制备的质量对于成功进行蛋白分析来说至关重要。本次内容主要从蛋白收集提取、亲和富集、准确定量到脱盐除杂进行讲解，努力为在蛋白质分析研究领域入门或探索阶段的科研人员提供完整的解决方案。
GE：蛋白样品过滤注意事项
蛋白质研究已经成为当今研究的热点之一，从蛋白表达，到分离纯化，再到结构功能研究。其中会不同程度地用到蛋白样品处理，这次我们基于高品质的Whatman过滤产品，介绍蛋白样品过滤处理中应该注意的小细节。
GE：重组标签蛋白纯化策略与方法
生物分子的分离纯化是获得有效生物产品的重要环节之一。在纯化过程中需要考虑目的物性质，合理选择及组合具有各自特点及优势的层析技术，才能达到最优的纯化效果，满足目标产品产量、纯度等多方面的要求。自世界上第一款凝胶过滤填料诞生开始， GE公司作为蛋白分离纯化领域的专家，始终和您站在一起。“如何综合安排纯化策略？如何有机运用纯化方法？如何灵活优化纯化条件？”在这个讲座中，我们将探讨这些重组标签蛋白纯化工作中的重点和难点。