翟所迪:制定中国万古霉素治疗药物监测指南
翟所迪,北京大学第三医院药剂科主任,北京大学治疗药物监测和临床毒理中心主任。中国药学会医院药学专业委员会副主任委员、中国药理学会治疗药物监测研究会副主任委员、卫生部合理用药专家委员会临床药学组组长。
2009年美国ASHP(卫生系统药师协会)颁发了美国的万古霉素TDM(治疗药物监测)指南,2013年日本颁发了日本的万古霉素TDM指南,这两个指南虽然对中国的万古霉素TDM有一定的指导作用,但还是与国内的万古霉素TDM现状有较大的差异,细菌的耐药性不尽相同。
重要的是美国、日本的万古霉素TDM指南的证据系统不是依据目前更规范的GRADE证据系统建立的。我们使用WHO的指南建立方法,首先用DELPHE方法优选了指南推荐意见的16个PICO,针对16个PICO制作了16个系统评价或meta分析。
对患者相关的一些推荐意见,采用问卷调查的方法了解了患者的意愿,我们尊重患者依据自己的价值观做出的选择。万古霉素TDM指南的形成对于指导国内万古霉素TDM工作具有重要的临床指导意义,是万古霉素个体化给药的规范,也是循证药学证据应用的高级阶段。
如何成功的开展RNAscope®实验:操作步骤指南
该视频由美国Advanced Cell Diagnostics公司的高级科学家讲解如何开展RNAscope®实验。内容包括:RNAscope®技术原理、实验所需的准备工作、实验过程中的注意事项和技巧、常见问题解答。
RNAscope®®原位定量专利技术由美国ACD公司(Advanced Cell Diagnostics, Inc., California, USA)开发,通过专利的双“Z”探针设计,使RNA原位杂交具有高度特异性、RNA单分子检测的敏感性并兼容自动化高通量分析,能够在单细胞水平同时定量多个RNA的表达。该视频由ACD公司制作,详细信息请访问ACD官网www.acdbio.com。更多中文资料请关注中国官方微信号(ACD_China)咨询。
吴硕琳:2016年中国特发性面神经麻痹诊治指南(上)
特发性面神经麻痹是常见的脑神经单神经病变,为面瘫最常见的原因,国外报道发病率在11.5-55.3/10万。该病确切病因未明,可能与病毒感染或炎性反应等有关。 本堂课介绍了它的诊断、治疗。
默克密理博Amicon二代搅拌式超滤杯组装简明指南
Amicon搅拌式超滤杯可以用于50mL-1L的样品浓缩、脱盐和换液,是病毒、核酸、蛋白、微囊泡、纳米颗粒等样品处理的必备装备。处理样品量大、磁力搅拌、可选择膜片范围广等特点,使其成为Amicon Ultra超滤管在超滤处理中的极好补充。除了生命科学中的应用,搅拌式超滤杯更在环境科学、污水处理、细胞治疗病毒制备、化妆品开发、药物剂型开发、食品饮料等领域有着广泛的应用。 新一代Amicon搅拌式超滤杯改良了结构设计,使其更符合人体工程学,组装、拆卸极为方便,操作更加安全,大大提升了用户体验。视频详解了Amicon二代搅拌式超滤杯的组装和操作过程,帮助初次使用者快速掌握使用。
抗体药生产工艺关键要点指南
本次讲座主要介绍抗体药生产工艺全流程,涵盖新药开发即从先导分子到上市许可申报过程中所途径的各个阶段CMC(Chemical, Manufacturing and Control)活动。CMC的阶段性研究是药物研发的重要方面,具体可分为初步工艺开发阶段(临床前研究、Ⅰ期临床研究),全面工艺开发阶段(Ⅱ期临床研究、Ⅲ期临床研究),工艺验证阶段,以及上市申请阶段。 本次讲座将重点介绍CMC阶段性研究所涉及的各个职能部门需要关注工艺开发、工艺放大、GMP生产等关键性要点,以确保在新药申报的激烈竞争中取得优势。
免疫荧光(IF)疑难排解指南:过度明显信号
“你的免疫荧光(IF)看起来像一团亮的东西吗?” 当你在显微镜下分析数据时,你看到的东西很重要。当你看到你所期望看到的,那是极妙的。但这里有些小技巧,来应对当你看到一些意想不到的结果。本视频中,我们将讨论阳性信号过强意味着什么,它有什么潜在的原因,以及这个问题的解决方案。
CUT&RUN技术的成功指南
与染色质免疫沉淀 (ChIP) 检测一样,核酸酶靶向切割和释放 (CUT&RUN) 是一项用于在细胞天然染色质环境下检测蛋白-DNA 相互作用的强大通用技术 (1-4)。这种测定法可用于检测与基因组某个特定区域有关的多种蛋白,或相反,用于检测与某种特殊蛋白有关的基因组的多个区域。此外,CUT&RUN 测定法可用于明确某种特殊蛋白-DNA 相互作用的空间和时间关系。例如,CUT&RUN 检测可用于确定各种蛋白因子被募集到某个基因启动子上的特定顺序,或用于“测定”基因激活期间整个基因位点上某种特殊组蛋白修饰的相对量。除了组蛋白,CUT&RUN 测定法还可用于分析转录因子和辅因子结合、DNA 复制因子和 DNA 修复蛋白的结合。 CUT&RUN 提供了一种检测细胞中蛋白-DNA 相互作用的快速、可靠且真正的低细胞数测定法。与 ChIP 实验不同,CUT&RUN 不存在甲醛交联、染色质碎裂和免疫沉淀,使之成为一种使蛋白-DNA 相互作用富集和检测靶基因的更快且更有效的方法。CUT&RUN 可在一天之内完成从活细胞到纯化 DNA 的过程,且经证明每次检测只需使用少至 500-1000 个细胞 (1,2)。和 ChIP 中碎裂所有细胞染色质不同,CUT&RUN 利用一种染色质抗体靶向消化方法,从而使背景信号比 ChIP 实验低得多。因此,CUT&RUN 仅需 ChIP-seq 检测所需测序深度的 1/10 (1,2)。最后,加入简单的Spike-in DNA 即可准确定量和标准化靶标蛋白结合,而这是 ChIP 方法无法实现的。这种方法可有效标准化样品间和实验间的信号。 我将讨论CUT&RUN的基本原理,以及在设计实验时需要考虑的重要因素。此外,我还将介绍Cell Signaling Technology(CST)的CUT&RUN Assay Kit(#86652)和CUT&RUN pAG-MNase酶,相关数据显示它能适用于多种细胞类型的组蛋白修饰,转录因子和转录辅助因子的研究。 参考文献 1.Skene, P.J. and Henikoff, S. (2017) Elife 6, pii: e21856. doi: 10.7554/eLife.21856. 2.Skene, P.J. et al. (2018) Nat Protoc 13, 1006-19. 3.Meers, M.P. et al. (2019) Elife 8, pii: e46314. doi: 10.7554/eLife.46314. 4.Meers, M.P. et al. (2019) Mol Cell 75, 562-575.e5. 研讨会PPT下载链接:http://learn.cst-c.com.cn/zh-cn/ppt-download-cut-run