个体化医疗领域中肿瘤标记物的研究进展
2013第一届数字PCR前沿应用研讨会于2013年8月20日（20日注册）~8月23日在敦煌（敦煌山庄）召开，2013年作为PCR技术诞生30周年，在美丽的敦煌，本次论坛围绕PCR技术以及新一代的微滴式数字PCR在肿瘤标记分子领域的应用展开研讨，海内外知名的相关领域卓有建树的科学家采用大会报告以及专题讨论的形式，结合国际上转化医学研究的前沿动态与发展趋势，为大家带来一场生命科学的学术盛宴。
全谱miRNA非标记芯片技术
芯片技术是miRNA表达谱高通量检测的主要手段之一，而常规芯片和测序技术常需要几小时的人工操作才能完成标记，导致成本过高、操作过于繁琐，重复性较差，因此，要走向临床比较困难。我们利用自主研发的技术，首次实现了高通量microRNA芯片的非标记检测，大幅度降低了检测的标记时间和检测成本。 报告首先介绍了目前主流的miRNA芯片技术，然后阐述了我们的芯片技术原理，并对性能进行了全面的评价和对比，除了无需对miRNA进行标记以外，还具有以下优点：1，高效识别小分子RNA中间和末端的单碱基缺失、冗余的差异，常规芯片技术难以实现；2，高灵敏度，检测限为20 fM，检测丰度跨4个数量级，满足绝大多数小分子RNA的检测；3，直接使用总RNA，无需预分离小分子RNA，无需样品标记，大幅度降低了检测的时间和成本；4，检测不受植物等miRNA的3'末端甲基化影响，而其他酶法标记的技术效率大幅度降低。 最后将我们的技术与测序技术进行了比较，认为我们的技术在检测成本、大量样品处理、数据分析、检测时间和重复性方面具有优势，是对比两种状态的miRNA表达谱的一个理想技术。
全谱miRNA非标记芯片技术
芯片技术是miRNA表达谱高通量检测的主要手段之一，而常规芯片和测序技术常需要几小时的人工操作才能完成标记，导致成本过高、操作过于繁琐，重复性较差，因此，要走向临床比较困难。我们利用自主研发的技术，首次实现了高通量microRNA芯片的非标记检测，大幅度降低了检测的标记时间和检测成本。
报告首先介绍了目前主流的miRNA芯片技术，然后阐述了我们的芯片技术原理，并对性能进行了全面的评价和对比，除了无需对miRNA进行标记以外，还具有以下优点：1，高效识别小分子RNA中间和末端的单碱基缺失、冗余的差异，常规芯片技术难以实现；2，高灵敏度，检测限为20 fM，检测丰度跨4个数量级，满足绝大多数小分子RNA的检测；3，直接使用总RNA，无需预分离小分子RNA，无需样品标记，大幅度降低了检测的时间和成本；4，检测不受植物等miRNA的3'末端甲基化影响，而其他酶法标记的技术效率大幅度降低。
最后将我们的技术与测序技术进行了比较，认为我们的技术在检测成本、大量样品处理、数据分析、检测时间和重复性方面具有优势，是对比两种状态的miRNA表达谱的一个理想技术。
刘 倩：循环肿瘤细胞（CTCs) 中 上皮细胞型，上皮间质型，及干细胞型标记物的表达与转移性结直肠癌患者的临床相关性评估
介绍了自己公司相关情况。提到了循环肿瘤细胞检测的临床应用探索。讨论了ｃｔＤＮＡ能否真实反映肿瘤组织的基因突变情况，即组织和血液基因检测结果的一致性，介绍了相关内容。提到了全国多中心肿瘤液态活检（ｃｔＤＮＡ）临床试验。
非酒精性脂肪性肝炎动物模型的药理学评价:组织病理和生物标记物
非酒精性脂肪性肝炎NASH是非酒精性脂肪肝的一种极端形式，其特征为肝脂肪导致的小叶炎症并随肝细胞损伤，进而引起肝脏纤维化，最终导致肝硬化以致肝细胞癌。其病理生理学发病原因是与最初肝细胞内脂质堆积有关，在联合第二个打击因素（有待进一步阐明）的刺激后，引发炎症和纤维化。目前在美国，非酒精性脂肪肝的发生概率在10-14%之间，而这其中会有10-30%的病人会转变为非酒精性脂肪性肝炎。目前在中国，非酒精性脂肪肝已经超过慢性病毒性肝炎，成为排名第一的肝脏疾病。临床诊断NASH的金标准则是肝组织活检和组织病理学评价。已经明确的NASH肝脏组织病理学特点包括脂肪变性、炎症、肝细胞凋亡和纤维化。用于估评研发药物体内药效的NASH动物模型应重现该疾病的二次击打病理生理学，及关键的组织病理特征。然而现有的脂肪肝及/或肝纤维化动物模型并不能完全满足人类NASH的病因学及/或组织病理学要求。 我们建立并验证了一个NASH动物小鼠模型，在该模型中，先以高脂饲料（HFD）诱导动物肥胖，然后用四氯化碳（CCL4）诱导纤维化，模拟人类NASH的二次打击。该模型动物产生明显肝脂肪变性，炎症反应，细胞凋亡（又叫肝细胞气球样变）及纤维化，所有这些病理变化都可以用人类NASH诊断标准作定量评价，并都吻合NASH的指标。我们已经确认纤维化、气球样变、炎症（在某种程度上）是高脂饲料和四氯化碳双重作用的结果，进一步说明了其与人类NASH病理的机制相似性。这一点与单纯HFD诱导的脂肪肝炎或CCL4诱导的肝纤维化及肝损伤形成鲜明对比。我们的模型已经用目前处于临床三期的INT-747（奥贝胆酸）作了充分的药效验证。INT-747的机制已经用生物标记物做了进一步的研究，即通过对该药的作用机制（MOA）相关的关键基因表达的定量。该模型已经用于测试其它NASH治疗药物，类似的生物标记物研究也验证各自的MOA。此外，我们也将该模型与作过比较。 这次我们邀请了药明康德生物部高级主任徐德鸣博士与大家进行在线交流，直接介绍有关的动物模型及动物实验的设计，分享该模型在测定新型治疗NASH化合物体内药效中的应用，比较用于NASH治疗药物的其它动物模型，对各类模型的特点进行对照。我们在研讨会最后设置了互动环节，如果您有任何问题，可以直接与徐博士及他的团队进行现场讨论。
Livecyte-定量非标记活细胞成像及分析系统
Livecyte是一款长时间非标记活细胞分析系统，其独特的QPI技术使得在细胞实验中不仅可以研究细胞群体的变化，也可以研究其中单个细胞的动力学和形态学变化，得到比其他实验方法更精确的结论。传统的划痕实验通常使用终点法，通过设置不同实验组来间接监测划痕愈合的过程。这种方式引入了不同实验组带来的实验误差，同时荧光的引入也对细胞生长状态带来了干扰。在观测细胞群体的情况下，通过这些手段我们往往还是不能很清楚的了解到划痕的愈合是由于药物增加了细胞增殖还是细胞迁移，并且一些低浓度药物对细胞的影响也不能确定。英国Phasefocus公司携手英国Hull大学(Univerisity of Hull)利用Liveycyte研究了在原代成纤维细胞的划痕实验中，划痕愈合的速度，细胞的运动轨迹，迁移速度，数量和细胞本身面积的变化，从而得出细胞在愈合过程中已经开始分化的结论。
安捷伦高性能荧光标记物：藻胆蛋白特性以及应用
荧光标记广泛应用于生物医学研究，藻胆蛋白是藻类特有的一种天然水溶性荧光蛋白，其独特的结构使其具有良好的生物相容性、超高的量子效率以及大斯托克位移等优异荧光特性，在流式细胞术、免疫标记等领域有广泛应用。安捷伦（原ProZyme）作为该类产品的全球著名供应商，其独有的生产工艺及流程管控，能够提供给用户可靠的产品。本次讲座将从藻胆蛋白的特性、种类及应用等方面来介绍安捷伦（原ProZyme）荧光藻胆蛋白。
