免疫荧光（IF）疑难排解指南：过度明显信号

“你的免疫荧光（IF）看起来像一团亮的东西吗?” 当你在显微镜下分析数据时，你看到的东西很重要。当你看到你所期望看到的，那是极妙的。但这里有些小技巧，来应对当你看到一些意想不到的结果。本视频中，我们将讨论阳性信号过强意味着什么，它有什么潜在的原因，以及这个问题的解决方案。

免疫荧光 (IF) ，甲醛与酒精固定的对比

本视频探讨了免疫荧光(IF)中两大固定剂的区别：交联固定剂如甲醛，脱水固定剂如甲醇和其他醇类。每种固定剂在对抗原表位的影响，或在对分子和亚细胞水平上结构的保护方面都各有其优缺点，了解它们对您感兴趣的蛋白质的影响是很重要的。

多重免疫组化(mIHC)的优化，抗体滴定和荧光基团配对

在为多重免疫组化（mIHC）设计抗体组合时，优化每种抗体的稀释度和与之配对的荧光基团是非常重要的，这可以确保目标蛋白均衡的信号集。

Berkeley Lights单细胞光导平台专题（一）：如何找到最佳的细胞？

：近日，阿斯利康（AstraZeneca）宣布，首个在人体进行的COVID-19中和抗体疗法（AZD7442）的随机、双盲、安慰剂对照、剂量爬坡I期临床试验（NCT04507256）已开始对首批受试者给药。AZD7442是来自COVID-19康复患者的两种单克隆抗体的组合，其中的单克隆抗体由范德比尔特大学医学中心（Vanderbilt University Medical Center，VUMC）发现并于2020年6月授权给阿斯利康，而这个抗体组合中至少有一项是基于Berkeley Lights公司的Beacon单细胞光导平台进行单B细胞克隆筛选而获得。 Berkeley Lights公司在今年7月登陆纳斯达克，这家生物技术公司在去年被知名商业杂志Fast Company评为全球十大最具创新力公司之一。疫情在全球快速蔓延之时，人们对于快速开发新冠治疗方法的需求变得非常迫切，在这样的背景下，Berkeley Lights凭借其主打产品Beacon平台在抗体药物发现中快速高效的解决方案受到诸多COVID-19疗法开发机构的青睐。 早在疫情爆发不久的今年2月4日，金斯瑞公司利用Berkeley Lights公司的Beacon平台对感染SARS-CoV-2（当时称2019 nCoV）的转基因小鼠血样进行筛选，在仅仅24小时内便鉴定出数个潜在的COVID-19阻断抗体。接下来几个月，Berkeley Lights与VUMC密切合作利用COVID-19康复患者血样筛选抗体，在分离出人B细胞后仅18天便成功地获得了SARS-CoV-2中和抗体序列，将其用于抗体合成。Berkeley Lights还与澳大利亚昆士兰大学通过远程合作的方式共同开发了基于Beacon平台的新型检测方法，将其用于COVID-19疫苗的开发，该项目已在今年7月份进入I期临床试验阶段。 事实上，除了抗体药物发现，Berkeley Lights的技术还被应用于广泛应用于细胞系开发、细胞疗法开发、免疫学研究、基因编辑以及合成生物学等领域，用户包括顶级制药公司、合同研究组织（CRO）和学术机构，其中包括Amgen，Novartis，AstraZeneca， Pfizer， BMS, GSK等数十家排名靠前的大型制药企业，也包括金斯瑞、百奥赛图、睿智化学等CRO/CDMO企业，以及Ginkgo Bioworks这样的创新的合成生物学企业等。 那么Berkeley Lights是一家什么样的公司？它的技术何以能有如此广泛的应用范围？在这些应用中Berkeley Lights的技术又是如何发挥作用的？ 本次网络研讨会我们特地邀请到Berkeley Lights公司市场营销高级副总裁John Proctor博士对公司及其技术和应用进行全面介绍。

超高分辨率荧光显微技术前沿与生物学应用

超高分辨率荧光显微成像可以说是近二十年来新兴的一项革命性技术，此前光学显微镜的分辨率只能达到200纳米，被称为阿贝衍射极限，而通常病毒和亚细胞结构的尺寸只有几十到200多纳米。超高分辨显微技术的诞生突破了这个极限，使得显微成像分辨率进入振奋人心的纳米级别时代，对于精细结构的研究得到了强力的技术支持。目前商业化比较常见的超高分辨荧光显微技术主要包括受激发射耗损显微术（STED）、随机光学重构显微术（STORM）、光激活定位显微术（PALM）、结构化照明显微术（SIM）等，基于这些技术开发的显微产品在细胞生物学、神经生物学、病毒学、植物学、病理学、遗传学、医学等领域都得到了逐步应用。 生物谷联合全球显微科技与分析科学仪器领导品牌徕卡显微系统，推出超高分辨率荧光显微成像空中讲坛，关注成像领域前沿技术进展的同时，也将聚焦此技术在生物学、医学领域的具体应用及取得的研究成果，以此推动超高分辨成像技术的广泛、高效使用，以及技术的持续更新发展。

Berkeley Lights单细胞光导平台专题（二）：生产用途的细胞株开发全新解决方案

在抗体药物开发过程中，细胞株开发（Cell Line Development, CLD）是CMC的起点。后续的CMC工艺开发、临床前和临床试验全都是基于确定的细胞株进行开展的。细胞株开发的速度、合规性影响到药物开发的进度和最终成败，细胞株产量影响到后续工艺放大的效率及生产成本，细胞株质量则影响到药物的安全性和有效性。 目前常见的细胞株开发技术平台包括：有限稀释法或流式细胞分选（FACS）结合成像、单细胞打印、成像辅助的克隆挑选等，但这些技术平台要么单细胞克隆效率低下、要么分离后的单细胞难以生长，费时费力，并且缺乏能够在单细胞水平检测抗体分泌的手段，导致无法预知单克隆放大培养后的产率，因此在起始阶段很容易丢失掉比例稀少的高产率高质量单克隆，容易导致整个细胞株开发过程低效、耗时且难以获得理想质量的细胞株。 Berkeley Lights的Beacon平台基于专有的光电定位及纳流技术，能够在微流控芯片上对单细胞进行精确操控。基于Beacon平台的细胞株开发流程可以在短短一周之内筛选出>99％单克隆保证率的高产细胞株。强大的影像记录以及数据分析能力记录了每个克隆的丰富特征图谱（滴度/产率/倍增时间等），无论是分泌传统还是非传统结构抗体分子的细胞，都可以快速进行在线滴度检测，且筛出的克隆与下游生物反应器的结果具有高度的一致性。 本次网络研讨会我们邀请到Berkeley Lights公司细胞株开发产品总监Renee Tobias，对Berkeley Lights技术在细胞株开发中的原理和应用进行详细阐述。

安捷伦高性能荧光标记物：藻胆蛋白特性以及应用

荧光标记广泛应用于生物医学研究，藻胆蛋白是藻类特有的一种天然水溶性荧光蛋白，其独特的结构使其具有良好的生物相容性、超高的量子效率以及大斯托克位移等优异荧光特性，在流式细胞术、免疫标记等领域有广泛应用。安捷伦（原ProZyme）作为该类产品的全球著名供应商，其独有的生产工艺及流程管控，能够提供给用户可靠的产品。本次讲座将从藻胆蛋白的特性、种类及应用等方面来介绍安捷伦（原ProZyme）荧光藻胆蛋白。

Berkeley Lights单细胞光导平台专题（三）：加速困难靶点的先导抗体发现——Beacon平台抗体发现的最新解决方案

过去三十年内人们开发出很多抗体药物用于治疗各种疾病，其中包括自身免疫性疾病，传染病以及癌症。然而，针对GPCR和离子通道等困难但很有前景的靶点，利用传统技术进行的抗体开发整体上进展缓慢而且有限。 杂交瘤技术由于细胞融合效率造成B细胞多样性的损失，文库展示技术存在亲和力和重轻链配对问题，新型单B细胞技术虽通过绕过杂交瘤技术的细胞融合步骤来获取更高B细胞多样性，然而大部分单B细胞方法不能提供抗体功能相关的信息，对无功能抗体进行测序、克隆、表达和表征造成了时间和资源的大量浪费。 Berkeley Lights的Beacon平台基于专有的光电定位及纳流技术，能够在微流控芯片上对成千上万个单B细胞进行精确操控和分离、并进行功能表征及回收以进行进一步的分析，大大缩短抗体发现周期并节约大量人力和物力，显著提高了抗体药物发现的效率。 本次网络研讨会我们邀请到Berkeley Lights公司抗体发现高级产品经理Anupam Singhal博士，对基于Beacon平台的最新工作流程在困难靶点抗体发现中的应用进展进行阐述。

LLLs_多通道成像实验的荧光基团注意事项

打破理论的极限-光学活体显微技术及其应用

1665年，随着第一台光学显微镜的问世，人类打开了微观世界的大门，从此开启了细胞，组织，器官等的研究。然而，光学显微系统的分辨率被限制，无法对更小的生物分子和结构进行观察。突破光学衍射极限，一直是科学家们梦想和追求的目标。虽然扫描电镜、扫描隧道显微镜及原子力显微镜等技术实现了纳米级的分辨率，但以上这些技术存在对样品破坏性较大，只能观测表面等缺点，并不适合生物样品，特别是活体样品的观测。近年来,光子学、生物医学和显微成像技术等领域的相互交叉和融合发展，一系列适合生物样品成像的超分辨成像技术应运而生，被广泛应用到对于生物系统新结构和新功能的探索中。作为生物学研究中不可或缺的技术，图像分析软件种类繁多，然而传统技术面临最大的障碍就是主观性和低重复性。传统图像分割流程可能会导致不达标的实验结果，并且需要大量的手动操作，会受到人为错误的影响。 基于此景，生物谷携手全球显微镜与科学仪器的知名品牌徕卡共同举办本次论坛。关注生物医学图像和信号处理最新研究进展、未来发展方向和成果转换的同时，也将聚焦徕卡最新的Aivia平台，以此推动高质量的生物图像分析技术在生物学研究领域的使用及持续发展。