鸡胚的壳內电转化
电转化是应用在生物医学研究中的技术,它通过将外源基因物质导入到细胞中来改变基因的表达。更确切地说,壳內电转处理的是蛋壳内的早期发育中的小鸡胚胎。在该过程中,先将DNA或敲除载体注射到目的组织中。然而,遗传物质不能穿透胞膜进入细胞内行使功能。为解决这个问题,可施加一个电场暂时破坏胞膜的完整性。该电场还会造成带负电荷的核酸穿过胞膜上的小孔向正电极迁移,因此有效地将DNA或敲除载体引入了细胞内。该技术的主要优点是可将遗传物质的导入定位到某个特定发育时期的特定组织中。这样就可研究操控某个发育事件的遗传机制。
本短片概述了壳內电转的原理,介绍了该技术要用到的工具,包括毛细针,电极和电转仪。还演示了该过程的逐步操作,接着讨论了如何利用该技术在鸡胚中进行多种遗传操作的几个有趣例子。
2015-12-31 课时:7分钟
鸡胚的去壳培养
鸡(家鸡)作为发育生物学的模式生物的一个优势是胚胎的发育在母体之外,并能方便地进行实验操作。许多技术可以使科学家对壳內的鸡胚进行研究,但它们对发育晚期的胚胎操作受到一定限制。值得庆幸的是,鸡胚还可以在壳外,也就是去壳进行培养。去壳培养的一个好处是能方便接触到组织,否则尤其是对于晚期发育阶段的胚胎,由于蛋壳的存在或鸡在蛋壳内的位置无法接触这些组织。
去壳培养有两个主要的方法:全蛋黄培养和移植培养。全蛋壳培养时,蛋壳被敲碎,里面的内容会被转移到一个简单的培养容器中。而在移植培养方法中,胚胎会从蛋黄中分离出来并固定在培养容器中来维持膜的张力,它对于正常发育很重要。
本短片将给出全蛋黄培养和移植培养技术的基本操作步骤,并将讨论在蛋壳外培养鸡胚的好处和坏处。最后,还会讨论到去壳培养的实验应用,演示如何用该技术来帮助显微观察胚胎和基因操作晚期胚胎。
2015-12-31 课时:7分钟