铃兰毒甙通过抑制锌指蛋白91介导的前IL-1β泛素化和Caspase-8炎症体活性来抑制IL-1β的产生

炎性小体激活通过触发促炎细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)的成熟和分泌来启动先天免疫反应。IL-1β的分泌需要两个连续的步骤：启动和激活。第一个启动事件由TLR与其配体相互作用后的各种PAMP触发，并通过激活NF-βB或应激激活的蛋白激酶ERK、κ和p38来诱导生物活性的前IL-1 TLP的合成。

ZFP91正向调节巨噬细胞IL-1β的产生，可能成为治疗炎症性疾病的潜在靶点。因此，作者研究了这一过程是否受到从中草药山杨(Adonis Amurensis Regel Et Radde)中分离出来的一种强心苷--卷曲霉毒素的调节。

图片来源: https://doi.org/10.1111/bph.15758

作为一种促炎细胞因子，IL-1β是炎症体信号通路的主要效应者，该通路将炎症体激活与先天免疫反应中的多个下游事件联系起来。IL-1β主要来源于巨噬细胞和单核细胞。炎症体是一种胞浆传感器，检测病原体感染、代谢失衡或组织损伤，导致IL-1β的成熟和释放。

在此基础上，作者描述了ZFP91介导的调控IL-1β分泌的信号系统，并检测了铃兰毒甙是否影响这一过程。结果表明，铃兰毒甙显著抑制ZFP91蛋白的表达，抑制Asc-NLRP3-Caspase-8炎症体复合物的募集，降低p-ERK、p-jnk和p-p38的表达，进而抑制IL-1β的分泌。

半胱氨酸蛋白酶caspase-8是炎症和细胞死亡的中心成分。它最初的功能被描述为外源性凋亡的启动者。Caspase-8似乎也介导了某些炎症细胞因子的最佳转录，而不依赖于调节细胞死亡。在这篇文章中，作者提供了caspase-8的作用的观点，并展示了caspase-8是如何参与由铃兰毒甙处理的THP-1细胞和BMDM的炎症过程。此外，作者还证实了铃兰毒甙通过抑制zfp91而抑制IL-1β的产生。

泛素化调节信号复合体中蛋白质间的相互作用和蛋白质稳定性。由于K63和K48是两条主要的泛素化链，作者在HEK293T细胞中共表达了His-Pro-IL-1β和HA-K48-泛素或His-Pro-IL-1β和HA-K63-泛素。

作者发现PRO-IL-1β被K48和K63连接的多泛素链修饰。重要的是，泛素K63能更有效地与前IL-1β连接。与野生型泛素连接的多泛素化类似，ZFP91的过表达特异性地促进了原IL-1β的K63连接的多泛素化。

病毒基因传递已经从仅仅在动物研究中的一种应用发展到在人类身上的一种实验性治疗策略。与其他病毒载体相比，AA V具有显著的优势，包括它没有致病性，能够在多个谱系的分裂和成熟的未分裂细胞中建立表达。此外，aav血清型可以在几周内实现高水平的转导，并在生物体的整个生命周期内保持这种水平。

在不同的av血清型中，aav9血清型作为一种最佳的全身基因传递载体而备受关注。因此，在本研究的动物模型中，AAV9-siZFP91-EGFP通过尾静脉注射到达身体的各个组织和器官。本研究表明，DGalN/LPS诱导的小鼠肝损伤、DSS诱导的结肠炎和明矾诱导的腹膜炎小鼠表现出明显的病理损害、炎症体活性和促炎细胞因子的分泌，而螺杆菌毒素治疗显著逆转了这些作用，表明在体内，螺杆菌毒素可以减轻炎症反应。

铃兰毒甙通过下调ZFP91抑制IL-1β产生的机制示意图

图片来源: https://doi.org/10.1111/bph.15758

综上所述，本研究结果首次证明，弓形虫毒素通过下调ZFP91，减少IL-1β的分泌，从而抑制非典型的caspase-8炎症体和丝裂原活化蛋白激酶信号通路的激活。重要的是，螺杆菌毒素可减弱ZFP91调节的K63连接的前IL-1β的泛素化，从而限制过度的炎症体活动。

作者在小鼠身上提供了明确的证据，证明铃兰毒甙可以改善ZFP91介导的炎症症状。这些研究表明，铃兰毒甙可以开发为治疗ZFP91相关炎症性疾病的新药。(生物谷 Bioon.com)

参考文献

Yue Xing et al. Convallatoxin inhibits IL-1β production by suppressing zinc finger protein 91-mediated pro-IL-1β ubiquitination and caspase-8 inflammasome activity. Br J Pharmacol. 2021 Nov 26. doi: 10.1111/bph.15758.