科研人员研发基于涡旋射流装置的免疫印迹分析方法

免疫印迹分析(immunoblotting)，又称蛋白质印迹(Western blotting)，根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法，是一种免疫生化技术。

免疫印迹法是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。 免疫印迹法亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法 Southern blot 相类似，亦被称为Western-blot.

免疫印迹分析（immunoblot assays，IAs）广泛用于生物标志物的检测，然而传统方法成本较高、耗时长、操作相对复杂，并且容易受到背景干扰，影响检测灵敏度。

近日来自加利福尼亚大学的研究团队研发基于涡旋射流装置（vortex fluidic device，VFD）的免疫印迹分析方法，利用薄膜微流体技术提高免疫印迹法的敏感性，将检测时间缩短至5分钟。相关研究成果发表于《Angew. Chem. Int. Ed.》，标题为Under-5-Minute Immunoblot Assays by Vortex Fluidic Device Acceleration。

研究人员在涡旋射流装置中安装一个可以快速旋转的石英管作为反应器，将抗原分布于夹在两张滤纸之间的硝酸纤维素膜中，将纸组件卷成圆柱体置于反应器内，在每个测定步骤之间添加和丢弃封闭、结合和洗涤液。研究表明，以45度的倾斜角放置反应器，在低转速下，反应器的机械能通过剪切应力和“龙卷风状”拓扑流体流动使液体穿过、进入和覆盖薄膜。在1500转/分钟的转速和4.5分钟的测定时间下，间接噬菌体免疫印迹分析展现了最高的信噪比和最低的误差。

研究利用涡旋射流装置开发了相对高效、经济和操作简便的免疫印迹分析方法，这种涡旋射流装置驱动的快速平衡体系加速了液相分子与固相目标物质的结合，为即时检测技术的发展提供了借鉴。