研究人员提出一种用于鉴定微量样品m6A的高效便捷建库测序技术
来源：中山大学 2021-09-10 07:00
中山大学生命科学学院骆观正教授团队提出一种用于鉴定微量样品m6A的高效便捷建库测序技术，鉴定到数千个高重复性m6A位点，为促进m6A功能研究提供方法学创新。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine， m6A) 是真核生物mRNA中含量最丰富的碱基修饰类型，动态调控mRNA的剪接、定位、降解等多种代谢通路，进而参与细胞分化、肿瘤发生、免疫反应等重
中山大学生命科学学院骆观正教授团队提出一种用于鉴定微量样品m6A的高效便捷建库测序技术，鉴定到数千个高重复性m6A位点，为促进m6A功能研究提供方法学创新。
N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine， m6A) 是真核生物mRNA中含量最丰富的碱基修饰类型，动态调控mRNA的剪接、定位、降解等多种代谢通路，进而参与细胞分化、肿瘤发生、免疫反应等重要生理过程。甲基化RNA免疫共沉淀高通量测序(MeRIP-Seq 或m6A-Seq) 是目前应用最广泛的m6A检测技术，但该技术通常需要大量起始RNA样品（>100μg总RNA），难以应用于微量样品的m6A检测，限制了其在临床稀缺样品和早期胚胎发育等场景中开展m6A研究。因此，该领域急需一种适用于低起始RNA量、简单快捷的m6A高通量测序技术。
该研究提出一种m6A高通量测序新技术：tMeRIP-Seq。该技术通过多聚胸腺嘧啶引物特异性地反转录含有PolyA尾的mRNA，利用Tn5转座酶切割RNA/DNA杂合链的特性，将mRNA/DNA杂合链片段化同时加上测序接头，极大地降低样品初始投入量并简化实验操作。基于这一策略，该研究以低至60ng总RNA为起始模板，鉴定到数千个可重复m6A位点，这些位点特异地富集于基因3′末端附近，并且有典型的RRACH基序。之后研究者应用该技术从一滴血中鉴定了m6A图谱，发现多个血液疾病相关基因可能受m6A调控。基于类似原理，tMeRIP-Seq技术未来还可能拓展到其它RNA修饰研究中。(生物谷Bioon.com）
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