《柳叶刀》：复旦团队发布国际首个耳聋基因治疗临床数据，成功恢复患者听力

复旦大学附属眼耳鼻喉科医院舒易来、李华伟、王武庆，哈佛大学医学院陈正一、东南大学柴人杰等在国际顶尖医学期刊《柳叶刀》（The Lancet）上发表了题为：AAV1-hOTOF gene therapy for autosomal recessive deafness 9: a single-arm trial 的研究论文。

这项在6名因OTOF双等位基因突变而听力严重障碍的患儿中进行的临床试验结果显示，AAV1-hOTOF作为一种常染色体隐性遗传性耳聋的新型基因疗法，具有良好的安全性和有效性。6名接受治疗的患儿中有5人获得了稳健的听力恢复和语言感知能力的改善。这些结果支持在常染色体隐性耳聋患儿中进行进一步的基因治疗研究。

腺相关病毒（AAV）上目前最广泛使用的体内基因治疗递送载体，其安全性已经在临床上得到了广泛验证。基于AAV载体的基因疗法非常适合内耳疾病治疗，AAV可以直接向内耳细胞局部递送，而不必暴露于体内的其他组织，减少潜在风险。此外，内耳毛细胞不分裂，因此，通过AAV递送进去的基因可以长期持续表达，从而产生持久的治疗效果。

但AAV-OTOF基因疗法时还面临着一个挑战，AAV能够装载的DNA片段的长度不超过4.7kb，而OTOF基因的编码区长度接近6kb（5994bp），超过了AAV载体的装载极限。

研究团队此前在小鼠实验中证实，使用双AAV载体分别递送Otof基因的一部分，成功恢复了Otof基因敲除鼠模型的听觉功能。然后，研究团队设计了基于AAV1-hOTOF的基因疗法，使用毛细胞特异性启动子启动hOTOF的表达，并在小鼠和非人灵长类动物中验证了安全性。

研究团队随后启动了一项单臂临床试验（临床试验注册号为ChiCTR2200063181），以调查AAV1-hOTOF基因疗法在常染色体隐性遗传耳聋9型儿童患者中的安全性和有效性。该试验纳入了6名因OTOF双等位基因突变而患有严重听力障碍或听力完全丧失，且未接受双侧人工耳蜗植入的儿童。研究团队向他们的耳蜗单次注射了AAV1-hOTOF，该试验的主要终点为注射后6周的剂量限制性毒性。还将评估治疗后的听觉功能和语言能力。

每个参与者的基线特征、基因型和接受的治疗剂量

在这6名接受AAV1-hOTOF基因治疗的患儿中，1人接受的剂量为9×1011 vg，其余5人接受的剂量为1.5×1012 vg。所有6名患儿完成26周的随访。整个过程没有发生剂量限制性毒性或严重不良事件。共总共观察到48起不良事件，其中46起（96%）为1至2级不良事件，2起（4%）为3级不良事件（1名患者的中性粒细胞计数下降）。

6名接受治疗的患儿中，有5人的听力得到恢复，表现为0.5-4.0 kHz的平均听性脑干反应（ABR）阈值降低了40-57分贝。在接受9×1011 vg剂量的患儿中，平均ABR阈值从基线的大于95分贝改善到治疗后4周时的68分贝、13周时的53分贝和26周时的45分贝。在接受1.5×1012 vg剂量的参与者中，平均ABR阈值从基线的大于95分贝，改善到治疗后26周时的48分贝、38分贝、40分贝和55分贝。

内耳注射AAV1-hOTOF前后听力测试

先天性耳聋儿童由于无法听到说话的声音，因此，他们在学习口语时会遇到困难，在听力恢复后，他们能够逐渐获得语言感知能力。因此，除了客观的听力测试外，语言感知也是听力损失儿童听力恢复的重要指标。该研究显示，治疗后听力得到恢复的5名患儿的语言感知能力均得到了改善。