巨噬细胞极化：抑制microRNA-494-3p激活Wnt信号并降低动脉粥样硬化中促炎症巨噬细胞极化

作者之前已经证明，使用针对miR-494-3P(3GA494)的第三代反义寡核苷酸治疗可以减少动脉粥样硬化斑块的进展，稳定早期和已建立斑块中的病变，并减少已建立斑块中的巨噬细胞含量。斑块内有不同亚型的巨噬细胞。在此，旨在研究miR-494-3p是否直接影响巨噬细胞的极化和激活。

图片来源: https://doi.org/10.1016/j.omtn.2021.10.027

本研究数据显示miR-494-3p在每个巨噬细胞亚型中都有不同的作用，在3GA-494处理后这一作用变得更加明显。M1巨噬细胞中抗炎受体和细胞因子表达水平的增加和M1标记物的减少都表明，在miR-494-3p抑制的作用下，M1极化向较低的炎症表型转移。这与抑制巨噬细胞免疫反应的STAT3的表达上调相一致。

3GA-494可进一步促进M2极化，作为抗炎标志物TREM2，在小鼠巨噬细胞中，M2标志物Arg1的表达进一步增强。抑制M1极化，增强M2极化，有利于减轻炎症和动脉粥样硬化。事实上，与3GA-ctrl小鼠相比，3GA-494治疗的致动脉粥样硬化小鼠的促炎标记物CCR2似乎减少了。

作者先前已经证明，3GA-494治疗后，斑块大小相应减小，斑块稳定性增加。很可能，巨噬细胞极化从促炎向抗炎的微妙转变促成了这种临床上有利的表型。

作者使用从外周血单个核细胞(PBMC)分化而来的原代人类巨噬细胞，将结果更接近于人类的临床环境。然而，捐赠者之间的生物学差异导致了对3GA-494治疗的反应比从相同遗传背景的小鼠分离和分化的小鼠巨噬细胞更大的差异。

流式细胞仪分析显示，3GA-494对小鼠巨噬细胞的极化反应有明显差异，M1和M2巨噬细胞M1、iNOS表达降低，M2 Arg1表达增加。虽然人类巨噬细胞遵循类似的模式，但对极化标记物的影响更加多变。

M2极化诱导内源性miR-494-3p表达，3GA-494处理可进一步诱导miR-494-3p的表达。之前已经证明，miR-494-3p抑制剂3GA-494处理后，miR-494-3p在某些细胞类型和组织中的表达意外增加，可能是通过自我调节机制。在这项研究中，作者发现这种现象甚至是同一细胞类型的差异极化子集所特有的。MicroRNA的加工可以受RNA结合蛋白的调节，而RNA结合蛋白又受microRNA本身的调节。

机制图总结

图片来源: https://doi.org/10.1016/j.omtn.2021.10.027

综上所述，3GA-494处理可抑制M1巨噬细胞miR-494-3p的表达，并抑制M1极化。同时，3GA-494处理可诱导miR-494-3p表达，增强M2极化，这既有利于减少动脉粥样硬化斑块的形成，又有利于提高斑块的稳定性。

此外，抑制miR-494-3p可降低M1巨噬细胞的促炎反应，至少部分是通过激活Wnt信号。因此，3GA494可能是一种潜在的治疗药物，用于稳定脆弱的病变，降低心肌梗死或缺血性中风等心血管事件的风险。（生物谷 Bioon.com）

参考文献

Eva van Ingen et al. Inhibition of microRNA-494-3p activates Wntsignaling and reduces proinflammatory macrophage polarization in atherosclerosis. Mol Ther Nucleic Acids. 2021 Nov 4; 26: 1228-1239. doi: 10.1016/j.omtn.2021.10.027.