CIR：浙大团队发现，被免疫细胞攻击的肝癌细胞会火速训练免疫抑制型巨噬细胞！

近日，浙江大学医学院附属第一医院徐骁团队在Cancer Immunology Research期刊发表的最新研究成果显示，受免疫系统攻击的肝细胞癌（HCC）细胞，会分泌前列腺素E2（PGE2）使CX3CR1⁺肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）转变为促癌表型，而后者会分泌白介素-27（IL-27）诱导CD8⁺T细胞耗竭，因此可将CX3CR1⁺TAMs作为增敏HCC免疫治疗的打击目标。

论文首页截图

基于此前学界的各种研究成果，浙大团队本次研究可以说是“直扑”CX3CR1⁺TAMs，使用接受PD-1抑制剂治疗的HCC小鼠模型，研究者们发现在免疫治疗启动后，HCC微环境内的TAMs数量会快速增加，至治疗第14天时已占全部肿瘤浸润免疫细胞的23.1%，是对照组占比的约1.8倍（12.3%），且CX3CR1⁺TAMs亚群的富集最为突出。

虽说基因集富集分析（GSEA）显示，这些CX3CR1⁺TAMs的代谢更为活跃，也存在抗原呈递、细胞因子信号等适应性免疫相关过程的基因表达上调，但没有它们对免疫治疗才很重要：研究者们使用抗CX3CR1单抗进行针对性清除后，伴随着CX3CR1⁺TAMs的数量大减，小鼠肿瘤也显著缩小，浸润到肿瘤的CD8⁺T细胞大增，显然是它们主导了这场“翻身仗”。

随之而来的下一个问题就是，既然清除CX3CR1⁺TAMs能显著增加浸润到肿瘤的CD8⁺T细胞，那CX3CR1⁺TAMs此前是怎么将CD8⁺T细胞拒之门外的呢？

研究者们首先对比了微环境中的CX3CR1⁺TAMs和CX3CR1-TAMs，发现CX3CR1⁺TAMs分泌的IL-27明显更多；共培养实验则证实，CX3CR1⁺TAMs具有上调CD8⁺T细胞免疫检查点分子TIM-3表达，下调对T细胞功能有关键影响的细胞因子（TNF-α、IFN-γ）的能力，而直接外源性加入IL-27，也足以使CD8⁺T细胞的功能被显著抑制。

CX3CR1⁺TAMs可通过分泌IL-27抑制CD8⁺T细胞功能

进一步分析（巨噬细胞Winn assay）显示，巨噬细胞过表达CX3CR1是因，随后上调IL-27分泌和发生表型转变是果，它们也确实加剧了HCC免疫微环境的抑制性。那么，导致CX3CR1⁺TAMs化身促癌帮凶的上游机制又是什么呢？研究者们发现，IFN-γ、白介素-4/13处理乃至乏氧状态都不是原因，但癌细胞培养上清液却可以诱导CX3CR1过表达。

更有意思的是，如果把常规癌细胞培养上清液，换成刚刚被CD8⁺T细胞攻击过的癌细胞培养上清液，巨噬细胞的CX3CR1表达上调就更显著了，原来癌细胞这是想办法给自己解围吗？研究者们分析了上清液中的癌细胞代谢物成分，由此揪出了PGE2这个关键调控节点，并证实外源性向巨噬细胞补充PGE2，就足以起到与加入IL-27一样的效果。

PGE2可上调CX3CR1表达，使此类TAMs转向促癌表型

而要说针对PGE2的方法，现成的简直不要太多，比如好多种非甾体抗炎药（NSAIDs），不就能阻断负责生成PGE2的环氧合酶-2（COX-2）么？研究者们选用了新一代药物塞来昔布进行实验，轻松达到了击退CX3CR1⁺TAMs、挽救CD8⁺T细胞以增敏HCC免疫治疗的目标，这无疑为研究成果的后续转化铺平了道路。