《癌细胞》：卵巢癌免疫治疗举步维艰，竟是因为化疗驱动巨噬细胞对T细胞“下黑手”！

近日，芬兰赫尔辛基大学团队在Cancer Cell期刊发表的最新研究成果显示，在占卵巢癌70-80%的高级别浆液性卵巢癌中，当前临床采用的标准化疗方案，会导致由巨噬细胞驱动的CD8⁺T细胞耗竭和排斥，能一定程度上解释免疫治疗对卵巢癌的效果不佳。

研究者们发现，导致CD8⁺T细胞耗竭的巨噬细胞，是名为“Myelonets”的免疫抑制性髓系细胞网络的一部分，这些髓系细胞不仅会相互串联，还会通过NECTIN2-TIGIT信号轴调控CD8⁺T细胞转入耗竭状态，而这也就是治疗干预来增敏卵巢癌免疫治疗的切入点。

一图总结论文核心内容

卵巢癌算是对含铂化疗比较敏感的实体瘤了，不然临床上也不会有铂敏感/铂耐药卵巢癌之分，但化疗终究会有失效的时候，特别是对于不存在BRCA1/2等同源重组修复缺陷（HRD）突变，不适合在化疗后接受PARP抑制剂维持治疗的患者，化疗耐药来得相当之快。按说在这种场景里，免疫治疗往往能站出来，但临床研究的结果大多不尽如人意。

赫尔辛基大学研究团队认为，此前学界对化疗影响卵巢癌免疫微环境的了解还是太少[2]，相当于两眼一抹黑就用药了。因此本次研究一上来，研究者们就对来自75例高级别浆液性卵巢癌患者的117例样本“火力全开”，进行基因组学、空间组学分析和单细胞测序，重点分析一线化疗（新辅助性质）前后发生的各种改变。

多组学数据首先显示，化疗确实会使卵巢癌免疫微环境发生显著改变，最明显的特征就是CD8⁺T细胞浸润显著增多，同时B细胞、调节性T细胞和髓系细胞浸润也上升，但结合空间组学数据来看，这种改变并不是均一的，因为肿瘤不同部位原本就存在各种癌细胞、间质细胞（如成纤维细胞）和免疫细胞的各自抱团，正式名叫“重复出现的细胞邻域”（RCNs），其中免疫细胞抱团的RCNs内，主要细胞类别就是包括巨噬细胞在内的各种髓系细胞。

肿瘤不同部位存在成分区别显著的“重复出现的细胞邻域”

而化疗不仅会导致各个RCNs的细胞构成发生显著改变，还会影响它们与其它细胞的相互作用，例如CD8⁺T细胞就从此前主要接触癌细胞，变成了主要接触M2型巨噬细胞和CD4⁺T细胞，且这种改变与患者“无铂间期”（PFI）较短、即对化疗应答较差有关。

研究者们又借助空间组学数据证实，不同于化疗前主要集中在“T细胞枢纽”（T cell Hub）内，化疗后浸润显著增多的CD8⁺T细胞，会广泛分布在髓系、间质细胞乃至癌细胞为主的RCNs内，且呈现明显的耗竭表型（表达关键标志物TIM-3）和激活状态下降（表达pSTAT1），免疫浸润增加反而不利于抗肿瘤免疫，确实是不太常见的现象。而进入到不同RCNs的CD8⁺T细胞，在TIM-3等标志物表达方面也有明显不同，改变可以说是“空间限制性”的。

化疗后卵巢癌的CD8⁺T细胞浸润虽显著增多，但整体状态却不利于抗肿瘤免疫

鉴于化疗后巨噬细胞与CD8⁺T细胞的相互作用更密切，而癌细胞与CD8⁺T细胞发生相互作用的绝对频率不变（相对下降），研究者们推测导致CD8⁺T细胞耗竭的元凶就是巨噬细胞，并通过细胞直接接触分析（Delaunay clustering），找出了髓系细胞们相互串联构成的Myelonets网络，它们小到由十几个细胞构成，大到参与的细胞成千上万。

而与Myelonets中髓系细胞发生相互作用的CD8⁺T细胞，普遍都进入了耗竭状态（TIM-3表达显著较高），可以说Myelonets就是一张抑制CD8⁺T细胞免疫应答的大网。而且相当反常规的一点是，在Myelonets中导致CD8⁺T细胞耗竭的巨噬细胞，竟然表型主要是M1型，和以往M1型巨噬细胞抑癌、M2型巨噬细胞促癌的常态是反过来的。

最后，通过进一步分析转录组学数据，研究者们证实化疗会使M1型巨噬细胞激活并表达NECTIN2，与表达NECTIN2相应配体TIGIT的CD8⁺T细胞在肿瘤外周间质发生相互作用，最终使CD8⁺T细胞进入耗竭状态，那结论也就不言自明了：用TIGIT抑制剂阻断NECTIN2-TIGIT信号轴，就有望逆转CD8⁺T细胞在化疗后的耗竭状态，为PD-1/L1抑制剂的使用奠定基础，不知道未来能不能看到这样的临床研究启动呢？

化疗导致CD8⁺T细胞耗竭的动态改变过程和TIGIT抑制剂的干预窗口