I-CRISPR：一种通过切割癌症特异性突变的个性化癌症治疗策略

来源：生物谷原创 2022-08-23 09:29

目前，癌症的治疗方法主要是手术、化疗和放疗，但仍有很大一部分患者不能完全治愈。大多数情况下，手术并不能去除所有癌细胞，而其他方法，如放射治疗和化疗，在杀死癌细胞时往往会对正常组织产生严重的不良影响。

目前，癌症的治疗方法主要是手术、化疗和放疗，但仍有很大一部分患者不能完全治愈。大多数情况下，手术并不能去除所有癌细胞，而其他方法，如放射治疗和化疗，在杀死癌细胞时往往会对正常组织产生严重的不良影响。因此，开发一种在不对正常细胞造成明显损害的情况下特异性杀伤癌细胞的策略，可能对癌症的治疗具有重要的临床意义。

图片来源: https://doi.org/10.1186/s12943-022-01612-x

近日，来自海军医科大学的研究者们在Molecular Cancer杂志上发表了题为“i-CRISPR: a personalized cancer therapy strategy through cutting cancer-specific mutations”的文章，该研究通过添加DNA损伤修复抑制剂(I)并通过CRISPR诱导癌细胞特异性DNA双链断裂，开发了一种新的精确个性化的癌症治疗策略--I-CRISPR。通过体外和体内实验，本证实了该策略在多种肿瘤模型中的有效性，并揭示了细胞死亡的机制。该研究策略可能会为精确的癌症治疗提供一个新的概念。

在第一步中，对患者的肿瘤样本进行DNA测序，以扫描患者癌细胞与正常细胞相比的独特DNA突变。在步骤2中，设计了一组针对这些突变但不识别任何正常基因组位置的定制引导RNA(GRNAs)，以开发适用的CRISPR-Cas9剪刀系统。在第三步中，将剪刀系统和DSBRi导入细胞，从而导致对癌细胞的特异性杀伤。

为了验证该策略，研究者首先通过全基因组测序分析了人肝细胞癌细胞系HepG2的DNA序列，发现了3,985,698个单核苷酸变异(SNV)和817,723个插入-缺失突变(INDELs)。据估计，有1000多个地点可能有潜力成为CRISPR适合本研究的目标。在本研究中，研究者选择了8个候选靶点来设计相应的表达gRNA-Cas9的腺病毒，并以以下组合加入到HepG2细胞中：阴性对照(NC)、4个靶点集合1(T4-Set1)、4个靶点集合2(T4-Set2)和8个靶点集合(T8-Set)。