Cancer Immunol Immunother：当“别吃我”信号遇上“肿瘤GPS”——双功能抗体精准狙击实体瘤，让免疫细胞精准吃掉癌细胞！

在癌症治疗领域，免疫疗法的出现彻底改变了肿瘤治疗的格局，尤其是单克隆抗体靶向免疫检查点的策略，已成为多种癌症的重要治疗手段。然而，对于上皮性卵巢癌（EOC）、胰腺导管腺癌（PDAC）等实体瘤，传统的适应性免疫检查点抑制剂（ICIs）响应有限，患者预后仍不理想，迫切需要新的治疗方案。

近日，Cancer Immunol Immunother发表了一项重要研究Targeted CD47 checkpoint blockade using a mesothelin-directed antibody construct for enhanced solid tumor-specific immunotherapy，报道了一种靶向CD47与间皮素（MSLN）的双功能抗体构建体——SIRPα-αMSLN局部抑制性检查点单克隆抗体（LicMAb），为实体瘤的免疫治疗提供了新方向。

一、研究背景

CD47作为一种“自我标记”分子，广泛表达于人体几乎所有细胞表面，通过与吞噬细胞上的信号调节蛋白α（SIRPα）结合，传递“别吃我”信号，维持机体免疫稳态。然而，许多肿瘤（尤其是血液肿瘤和实体瘤）会过度表达CD47，借此逃避免疫监视。尽管靶向CD47的单克隆抗体（如magrolimab）在血液肿瘤中展现出抗肿瘤活性，但CD47在健康细胞的广泛表达导致严重的“脱靶毒性”（如贫血、血小板减少），且高剂量用药需求因“抗原汇”效应进一步限制了临床应用。

间皮素（MSLN）是一种肿瘤相关抗原，在EOC、PDAC和间皮瘤等实体瘤中高度表达，而在正常组织中表达有限，是理想的肿瘤靶向分子。基于此，研究团队设计了一种双功能抗体LicMAb，将低亲和力的SIRPα结构域与抗MSLN IgG1抗体融合，旨在实现肿瘤特异性CD47阻断，同时激活固有免疫效应细胞，避免健康细胞损伤。

二、核心研究结果

1. CD47与MSLN在实体瘤中的高表达验证

通过对癌症基因组图谱（TCGA）的泛癌分析显示，MSLN mRNA在EOC和PDAC中显著富集，其蛋白表达在EOC原发肿瘤细胞和腹水中均呈高阳性。CD47 mRNA在所有评估的癌症中普遍高表达，其中EOC的CD47表达水平最高，蛋白水平在肿瘤组织来源的细胞中尤为显著。基因组分析显示，EOC中MSLN和CD47的扩增频率分别为2%和6%，进一步支持两者作为免疫治疗靶点的潜力。

图 1：上皮性卵巢癌（EOC）表现出高MSLN和CD47 mRNA及蛋白水平

2. SIRPα-αMSLN LicMAb的构建与特异性验证

研究团队通过将SIRPα的N端胞外结构域与抗MSLN IgG1抗体的轻链融合，构建了LicMAb。表面等离子体共振（SPR）显示，LicMAb对MSLN的结合亲和力保持在低纳摩尔级别，而对CD47的结合亲和力较低（K_D=1 μM），符合SIRPα天然低亲和力特性。流式细胞术证实，LicMAb仅结合MSLN阳性的肿瘤细胞（如EOC细胞系OVCAR-3、PDAC细胞系SUIT2-MSLN及原发EOC细胞），而不结合MSLN阴性的健康细胞（如红细胞、中性粒细胞）。即使在存在高浓度可溶性MSLN（模拟肿瘤微环境中的抗原汇）的情况下，LicMAb仍能维持对肿瘤细胞的结合能力，显著优于传统抗MSLN单克隆抗体。

图 2：工程化SIRPα-αMSLN局部抑制性单克隆抗体（LicMAb）具有MSLN特异性靶向和CD47阻断能力

图 3：SIRPα-αMSLN LicMAb避免脱靶结合

3. 强大的抗肿瘤免疫效应：ADCC与ADCP双重机制

抗体依赖性细胞毒性（ADCC）：LicMAb通过IgG1的Fc受体激活自然杀伤细胞（NK细胞），诱导肿瘤细胞死亡。在OVCAR-3和SUIT2-MSLN细胞系中，LicMAb介导的ADCC效应显著强于单纯抗MSLN抗体，与高亲和力抗CD47抗体（h5F9-G1）相当，但对健康血细胞无毒性。实时细胞分析显示，LicMAb诱导的NK细胞活化和脱颗粒效应呈剂量依赖性，进一步验证其抗肿瘤活性。

抗体依赖性细胞吞噬（ADCP）：LicMAb通过阻断CD47-SIRPα轴并提供IgG1介导的促吞噬信号，显著增强巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬能力。在OVCAR-3细胞中，LicMAb诱导的吞噬率达31.8%，显著高于抗CD47抗体（25.4%）和抗MSLN抗体（15.7%）。在PDAC细胞系中，LicMAb的吞噬诱导能力同样优于双特异性抗体（CD47xMSLN bsAb）。

4. 临床前模型中的有效性验证

在患者来源的EOC类器官（PDOs）模型中，LicMAb联合NK细胞可显著诱导肿瘤细胞死亡，表现为类器官结构崩解和细胞活力显著下降。免疫荧光染色证实，PDOs中MSLN表达均匀且高于原发肿瘤组织，提示LicMAb对肿瘤干细胞样细胞的靶向潜力。与传统药物（如magrolimab）相比，LicMAb在类器官模型中展现出更强的杀伤效力，为临床转化提供了关键证据。

图 4：SIRPα-αMSLN LicMAb诱导EOC类器官的NK细胞介导的细胞毒性

三、总结与展望

这项研究成功开发了一种肿瘤限制性CD47阻断策略，通过双功能抗体LicMAb实现了MSLN阳性实体瘤的精准靶向与免疫激活。其核心优势包括：①利用低亲和力SIRPα结构域避免健康细胞毒性；②通过IgG1-Fc受体同时激活NK细胞和巨噬细胞，诱导ADCC和ADCP双重抗肿瘤效应；③在可溶性抗原存在下仍保持功能活性，克服了传统抗体的抗原汇限制。

尽管目前研究仍处于临床前阶段，但其在多种实体瘤模型中的优异表现，为EOC、PDAC等难治性肿瘤的治疗开辟了新路径。未来，LicMAb与其他免疫疗法（如PD-1抑制剂、STING激动剂）或化疗的联合应用值得进一步探索。随着转化医学的推进，这种兼具安全性与有效性的双功能抗体有望尽早进入临床试验，为实体瘤患者带来新的希望。（生物谷Bioon.com）

参考文献：

Reischer A, Leutbecher A, Hiller B, et al. Targeted CD47 checkpoint blockade using a mesothelin-directed antibody construct for enhanced solid tumor-specific immunotherapy. Cancer Immunol Immunother. 2025;74(7):214. Published 2025 May 22. doi:10.1007/s00262-025-04032-0