《癌细胞》：食管癌精准免疫治疗获突破！剑桥大学卢欣教授团队揭示，肿瘤内单核细胞可作为生物标志物

免疫检查点抑制剂（ICIs）们接连不断的临床研究成功，让食管癌的治疗格局在最近几年迎来了巨变，特别是针对我国多发的食管鳞癌（ESCC），ICIs+化疗的联合方案，已有望覆盖从晚期到可手术患者的治疗全程。

不过公正地说，当前的食管癌免疫治疗还不够精准，除PD-L1表达水平外，临床仍然缺少指导用药、预测疗效的生物标志物，相关探索得快马加鞭了。

今天发表在Cancer Cell上的一项最新研究，就揭示了有望指导食管腺癌（EAC）免疫治疗的生物标志物：牛津大学路德维希癌症研究所卢欣教授团队发现，EAC中浸润的单核细胞数量较多，与患者接受ICIs+化疗后更好的临床结局有关，将该指标与肿瘤突变负荷（TMB）联合应用，预测功效还能更好。

论文首页截图

卢欣教授团队的研究基于一项临床I/II期试验（LUD2015-005）开展，该研究主要入组无法手术的EAC患者，先以PD-L1抑制剂度伐利尤单抗治疗4个周期，并±单次CTLA-4抑制剂治疗进行“免疫增敏”，再接续度伐利尤单抗+化疗的联合治疗，这种治疗模式使患者的中位总生存期（OS）达到13.4个月。

LUD2015-005研究设计及患者生存期数据

从影像学检查的肿瘤体积变化来看，约40%的患者通过治疗实现获益，这个比例和临床实际情况差异不大，而且前4周的免疫治疗（ICI-4W）就足以使肿瘤缩小，可决定患者临床获益的因素是什么呢？

研究团队对33例EAC患者在治疗期间各个时间点的肿瘤活检样本，采用RNA批量测序、单细胞测序、全外显子组测序等手段展开全方位分析，并与正常组织样本匹配，还借助了癌症基因组图谱计划（TCGA）等外部数据库的资料。

第一个发现来自RNA批量测序：与治疗前相比，ICI-4W期间肿瘤样本内表达上调最明显的基因，主要与细胞毒性炎症有关，如T细胞趋化因子（如CXCL9/10/11）、T细胞/NK细胞标志物（如CD2、CD3/E）、细胞毒性分子（如GZMA/H/K）等。

研究团队以此定义了一组基因特征“INCITE”，纳入基因的表达上调幅度与EAC患者的治疗应答，即肿瘤是否缩小高度相关，不过INCITE特征还不足以充分反映免疫治疗的长期疗效，为此研究团队又进一步筛选出12个预测效能最好的基因（INCITE-12），这样既能提示长期预后，又更便于临床使用。

INCITE特征的确立和具体情况

接下来，研究团队对比了临床获益与未获益患者活检样本的基因表达差异，发现PD-L1表达水平并不能预测ICIs+化疗的获益，但基因集富集分析（GSEAs）提示与临床获益相关的基因，却大多与髓系细胞有关，而不是T细胞或免疫检查点，看来操控EAC免疫微环境的主角，就藏在髓系细胞之中。

基于对健康人及临床研究患者共6.5万个细胞的单细胞测序，研究团队开展了进一步分析，发现EAC中确实存在更多的单核细胞、巨噬细胞（M1型）和中性粒细胞，且它们普遍表达与免疫治疗临床获益有关的固有免疫相关基因。

借助反褶积（Deconvolution）算法，研究团队得以确定了单核细胞与免疫治疗获益的关系：12例肿瘤单核细胞含量（TMC）较多的患者，有8例（67%）能够达到临床获益，而单核细胞较少患者的临床获益率只有25%（5/20）。

TMC还与抗癌治疗的“金标准”，即EAC患者的OS显著相关（HR=0.38, p=0.0008）：高TMC患者的中位OS为24.3个月，低TMC患者则仅为8.6个月，而其它免疫细胞亚群都不存在与患者临床结局的明显相关性。

TMC与EAC患者临床结局的关系

TCGA等外部数据库资料则显示，TMC与EAC患者临床结局的这种相关性，仅存在于接受含ICIs方案治疗的患者群体中，且TMC最适合预测EB病毒阴性/微卫星稳定型（EBV-/MSS）EAC患者的临床结局。

最后，研究团队分析了TMC与TMB等现有免疫治疗生物标志物的关系，发现TMB与TMC是相互独立又互补的关系，二者联合使用与ICIs的缩瘤疗效（在ICI-4W期间）相关性更强，也与患者OS和无进展生存期（PFS）均有相关性。

TMB+TMC的预测作用

分析还显示，ICI-4W期间临床获益患者的肿瘤单核细胞含量反而明显下降，这是因为ICIs改写了单核细胞等髓系细胞的表型，使它们更有利于抗肿瘤免疫，具体表现为巨噬细胞向M1型极化、I/II型经典树突状细胞（cDC1/cDC2）增多等，这可能在机制层面解释了TMC为何能预测EAC免疫治疗效果。

研究内容总结

研究团队在论文中表示，检测TMC可通过二代测序（NGS）完成，因此在临床实践中可与TMB同时检测，更好地预测EAC免疫治疗效果，乃至推广到更多已普遍采用免疫+化疗联合治疗模式的癌症当中。