评述： 快速检测支原体的核酸扩增技术在生物制剂的质量控制和批次放行测试中的应用

支原体属于细菌，但它们缺少细胞壁，这使得它们比传统的细菌更加“形态多变”。鉴于支原体在细胞形态上的可塑性和较小的细胞尺寸，它们能够通过0.1微米的除菌过滤器。它们普遍存在于人类、动物和植物中，因此生物制药生产过程或研发中使用的任何来自动物或植物的原料潜在地含有支原体。此外，一些支原体甚至能够通过形成生物膜在环境中长期存活。因此，在生物制品生产过程中，细胞培养原材料是它们的潜在污染源，加之生物反应器为它们提供的有利生长条件，使得生物制品中的支原体污染并不罕见，从而引起了人们的高度关注。

检测支原体是否存在于生物制品中是各国药物监管部门的强制性规定，也是生产过程中采取的质量控制（QC）措施中的一个必不可少的部分。但是，利用传统的培养方法检测支原体有时会面临着重大的挑战。存在的困难包括支原体相对较小的细胞尺寸，广泛的属种多样性，部分支原体可侵入细胞内部，它们在液体培养中产生的浊度有限，以及在标准的支原体生长培养基中，一些物种和菌株是无法培养的。因此，轻度的支原体污染可能在很长一段时间内没有被检测出来，所造成的灾难性后果却是厂房的关闭清理、生产时间的浪费和可观的收入损失。

基于这种情形，2017年10月，来自支原体检测服务公司（Mycoplasma Biosafety Services GmbH） 的Renate Rosengarten教授、Carl-Ulrich Zimmerman博士和Martina Sauert博士针对支原体检测方法在European Biopharmaceutical Review期刊上发表了标题为“Rapid Methods”的综述文章。这些作者们指出尽管最近有大量的努力来开发和采用快速检测支原体的核酸扩增技术（NAT）作为生物制药生产过程中的质量控制和批次放行（lot release）的测试方法，但是利用这种方法获得监管机构批准的生物制剂数量仍然是比较少的。不过，基于NAT的快速测试方法的不断开发、技术改进和对数个具体药物的NAT验证方法的使用经验增加，使得监管机构批准这类测试方法作为过程控制和批次放行测试的早期预警方法成为可能。将这类快速测试方法与自动化样品制备仪器的最新创新相结合就可允许在同一天内进行低成本的高通量测试，以便可靠地排除整个生产过程中存在的支原体污染，从而最终确保产品的批次放行。鉴于具有相当大的优势，它们有望在未来被人们越来越多地用于取代检测支原体的传统培养方法。这可能会引发生物技术和生物制药行业中的质量控制和批次放行测试变革。

原文链接：http://www.samedanltd.com/magazine/12/issue/278/article/4663