Nature：方晓峰团队发现凝聚体可以内陷和切割细胞内膜
来源：生物探索 2024-10-12 13:47
研究揭示了植物蛋白FREE1相分离形成凝聚体，通过润湿作用诱导内体膜的内陷和不稳定性，足以在不依赖ESCRT机器和ATP的情况下介导ILV的形成。
多囊泡体（MVBs）是细胞内的重要细胞器，在细胞质量控制中扮演着关键角色。MVB膜通过内陷和切割形成腔内小泡（ILVs），负责分选蛋白质货物，这一过程按当今的理解需要ESCRT蛋白复合体消耗ATP来完成【1】。近些年研究显示，生物分子凝聚体是细胞行使其功能必不可少的介观结构，通过多种多样的机制发挥作用。凝聚体可以与膜相互作用发生“润湿（wetting）”并引发毛细（capillary）现象【2】。然而，润湿相关毛细力在细胞过程中的生物学意义仍然知之甚少。
2024年10月9日，清华大学方晓峰实验室与合作者在Nature杂志在线发表了题为Biomolecular condensates mediate bending and scission of endosome membranes的研究论文，揭示了植物蛋白FREE1相分离形成凝聚体，通过润湿作用诱导内体膜的内陷和不稳定性，足以在不依赖ESCRT机器和ATP的情况下介导ILV的形成。Nature杂志同期以Research Briefing的形式对该工作进行了题为Cell membranes shaped and cut by phase-separated liquid protein condensates的报道。
图1. FREE1相分离是其发挥功能所必需的。（a）不同形式FREE1蛋白的结构示意图；（b）不同形式FREE1体外相分离实验；（c）所示基因型植物的发育表型（Credit: Nature）
进一步，研究团队通过体外重构和计算机模拟FREE1凝聚体与膜的相互作用，发现FREE1凝聚体可以在极短的时间内使得膜发生弯曲内陷。在体外重构实验中，研究者观察到在没有ESCRT复合体存在的情况下，FREE1凝聚体填充的小膜泡可以在大膜泡GUV内侧形成并在内部自由扩散（图2），表明FREE1凝聚体本身足以介导囊泡剪切。物理理论计算发现支持这一猜测。作者进一步提供了很强的遗传学证据：在缺失ESCRT的植物中过表达可以形成凝聚体的FUS-IDR-FREE1，发现能够很大程度上实现MVB内ILV的形成。
最后研究者还发现，尽管可以相分离但不招募ESCRT的FUS-IDR-FREE1能够满足植物在正常条件下的生长发育，但不能满足植物在高盐和干旱等条件引起的渗透胁迫下的萌发和存活率，说明ESCRT蛋白机器和FREE1凝聚体可能是进化过程保留下来的实现MVB产生的双保险机制，也能够更好地应对环境的变化。胁迫条件下这两种机制如何相互协同还有待未来进一步研究。
图2. 多手段揭示FREE1凝聚体与膜的相互作用。（a）体外FREE1液滴（紫色）与GUV膜（绿色）的相互作用；（b）计算机模拟液滴（紫色）通过浸润内陷膜（绿色）的动态过程；（c）物理理论计算膜颈切割所需的力与液滴大小之间的关系（Credit: Nature）
综上，此研究揭示了一种不同于传统认知的、由ESCRT机器消耗ATP介导的、MVB产生的新机制：FREE1相分离形成的具有液态属性的凝聚体，通过其产生的毛细力驱动MVB膜内陷，引起膜颈的不稳定进而完成膜的剪切形成ILV，该过程不依赖ESCRT机器和且不ATP消耗。这一研究极大地拓宽了相分离在生物学中功能研究的维度，加深了我们对细胞内膜系统重塑的理解。
参考文献
1. Vietri, M., M. Radulovic, and H. Stenmark, The many functions of ESCRTs. Nat Rev Mol Cell Biol, 2020. 21(1): p. 25-42.
2. Gouveia, B., et al., Capillary forces generated by biomolecular condensates. Nature, 2022. 609(7926): p. 255-264.
3. Zhang, H., et al., Large-scale identification of potential phase separation proteins from plants using a cell-free system. Mol Plant, 2023. 16(2): p. 310-313.
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