CAR-T之父最新论文：敲除两个基因，改善实体瘤的T细胞治疗效果

CAR-T细胞疗法是由每个患者自己的T细胞通过基因工程改造而来的，从患者血液中收集T细胞，在实验室中改造和扩增，然后作为一种“活细胞药物”重新输回患者体内。

宾夕法尼亚大学的 Carl June 教授的研究带来了2017年获批上市的世界首款CAR-T细胞疗法。目前，FDA共批准了6款CAR-T细胞疗法上市，彻底改变血液类癌症的治疗方式。然而，对于更常见的肺癌、乳腺癌等实体瘤，CAR-T仍然效果不佳。

2023年3月15日，宾夕法尼亚大学 Carl June 团队在《美国国家科学院院刊》（PNAS）上发表了题为：Combined disruption of T cell inflammatory regulators Regnase-1 and Roquin-1 enhances antitumor activity of engineered human T cells 的研究论文。

该研究开发了一种帮助T细胞攻击实体瘤的“组合拳”新方法，通过CRISPR-Cas9敲除两种T细胞炎症调节因子Regnase-1和Roquin-1，可将T细胞扩增水平增加至少10倍，从而增强抗肿瘤免疫活性和持久性。这些结果表明，免疫炎症调节因子可能是提高CAR-T或TCR-T抗肿瘤反应的有潜力的靶点。

论文通讯作者 Carl June 教授表示，我们希望为实体瘤患者开发可用的CAR-T细胞疗法，包括最常见的癌症类型。这项新研究表明，靶向免疫炎症调节剂以增强T细胞的效力，值得进一步研究。

Carl June 教授

CAR-T细胞疗法在实体瘤中的面临的主要挑战是T细胞耗竭（T cell exhaustion），即来自实体瘤的肿瘤细胞持续抗原暴露使T细胞损耗到不能产生抗肿瘤反应的程度。将来自实体瘤患者体内的已耗竭的T细胞用于CAR-T细胞治疗会带来较差的效果，这是因为这些T细胞无法有效扩增，也不能“记住”它们的任务（杀伤肿瘤细胞）。

之前的一些观察性研究提示，炎症调节因子Regnase-1是间接克服T细胞耗竭影响的潜在靶点，当T细胞被破坏时，Regnase-1会引起过度炎症，使它们恢复以产生抗肿瘤反应。研究团队猜测，如果同时抑制另一个相关但独立的炎症调节因子Roquin-1可能进一步促进抗肿瘤反应。

研究团队对两种处于临床阶段的T细胞疗法进行了研究，分别是靶向间皮素的CAR-T细胞疗法mesCAR-T和靶向人食管鳞状上皮癌抗原1的TCR-T疗法NYESO TCR-T。使用CRISPR-Cas9基因编辑技术分别敲除它们的Regnase-1或Roquin-1，或同时敲除Regnase-1和Roquin-1。

CRISPR-Cas9基因编辑后的工程T细胞被扩增并输入实体瘤小鼠模型中，研究团队观察到，敲除Regnase-1或Roquin-1均能提高CAR-T或TCR-T的效果。而双重敲除能够将工程T细胞扩增至少10倍，还增加了抗肿瘤免疫活性和工程T细胞寿命，带来最佳抗肿瘤效果，其中Regnase-1是主要贡献者。

在实体瘤治疗中，经常看到CAR-T细胞的扩增受限，如果能够让这些T细胞更有效，并大量帮助大门大量扩张，就能让T细胞疗法更好地攻击实体瘤。

该论文的第一作者 David Mai 博士表示，这两个炎症调节因子中的每一个都涉及限制T细胞炎症反应，而将它们同时抑制比单独抑制一个产生更强大的抗癌效果，在之前研究的基础上，这项研究让我们越来越接近在实体瘤环境中有前景的CAR-T细胞治疗策略。