国内首次！ 我国生物工业界揭示ADC耐药机制，并展示新一代ADC技术平台

抗体偶联药物（Antibody-drug conjugate，ADC）, 从这个概念的提出（Magic Bullet, Paul Ehrlich, 1913）到第一款ADC药物的成功问世（Mylotarg, Pfizer Inc., 2000）,科学家用了将近百年的时间。而又经过了10年的沉寂后，ADC药物开始逐渐绽放出它的魅力所在。

如今，越来越多的机构和企业投入到了ADC药物研发的领域，经过多个ADC技术和产品的迭代，Trodelvy和Enhertu（DS-8201a）的问世将可裂解连接子-喜树碱类的ADC药物推入了公众的视线，后者更是将ADC的“准入门槛”提升到了一个新的高度。尽管如此，（除了在少数肿瘤之外，比如乳腺癌）这些ADC在绝大部分肿瘤病人中仍然疗效不佳，而且几乎都会遇到天然和获得性耐药，因此存在较大的改进空间。深刻并准确理解DS-8201a或TrodelvyY的耐药机制成为变得需要和迫切。

近日，我国制药企业普众发现（Multitude Therapeutics）的研究团队在癌症研究领域顶刊 Cancer Discovery 上发表了题为：Antibody-exatecan conjugates with a novel self-immolative moiety overcome resistance in colon and lung cancer 的研究论文。

该研究详尽揭示了DS-8201a（及其他DXd家族ADC）和TRODELVY的耐药机制进，并且以此为基础设计，筛选出一类新型ADC——T moiety-exatecan ADC。

与现有技术相比，这一新技术得益于更优的“疏水屏蔽效应”与稳定性，大幅度提高了ADC治疗效果，延长了药物作用时间，能够克服多重肿瘤耐药性，重要的是毒副作用并没有增加，进一步提升了现有ADC药物的治疗窗口。T moiety-exatecan ADC有望成为“后8021”时代的下一代ADC的代表。

研究团队选择依喜替康（Exatecan，Topoisomerase I inhibitor），作为载荷，对比研究了DXd和SN-38另外两种同类型的毒素。通过多种机理的研究证实依喜替康具有杀伤能力强，作用速度快，多重耐药机制（MDR）影响小等的独特抗肿瘤载荷优势。研究团队基于该载荷开发了一系列的“T moiety”连接子并从ADC理化性质和细胞水平的抗肿瘤活性进行了全面的评估，确定了T800-T1000作为优选的依喜替康连接子, 克服了依喜替康因为其过强的疏水性导致无法直接偶联抗体的特性，并赋予了ADC更强的旁观者效应和肿瘤浸润能力。

重要的是，该研究比较了多个连接子亲水修饰化学（PEG，糖苷酶等）和位点（多肽或者MC）。通过筛选，确定了在距离载荷距离最近的自我断裂结构pAB上修饰比于其他位点修饰更能够增加ADC的稳定性和亲水性。T800-T1000的修饰化学也比PEG和糖苷酶等经典亲水修饰更有优势。

图1. Exatecan/DXd/SN-38机理研究 （图片来源：参考资料1）

研究团队应用T1000偶联技术，进一步在多个成药靶点上（HER2, TROP2, HER3, CDH6）进行了“头对头”的抗肿瘤活性药效实验研究。药效模型包含了多个不同的适应症（肺癌、结直肠癌、胰腺癌、肾癌等），不同的模型类型（CDXs、PDXs、syngeneic mouse model），不同的MDR特征，并且涵盖了所有研究靶点的表达量高低以及癌症主要基因突变类型。通过这样一套全面的小鼠体内药效数据，充分证明了“T moiety”技术相比较现有的DXd/SN-38偶联技术更加优秀的抗肿瘤活性和更宽广的适用性。

图2. 体内药效研究 （图片来源：参考资料1）

在药物的安全性方面，研究团队进行了大鼠和食蟹猴的毒理实验，并在体外细胞水平进行了骨髓抑制毒性实验，实验结果证明虽然依喜替康作为小分子药物在抗肿瘤活性强于DXd/SN-38的同时，毒性也相对更强，但是通过T1000偶联技术将其作为载荷开发成ADC药物之后，ADC药物的毒性被成功的有效控制在了和DXd/SN-38类ADC药物相当的一个水平，相比于DS-8201a和Trodelvy，数倍提升了治疗窗口。同时展示出T moiety化学增加ADC稳定性，降低毒性的特点。

图3. 治疗窗口比较 （图片来源：参考资料1）

同样重要的是，研究数据显示T moiety-exatecan ADC和其他抗肿瘤分子有协同效应，从而为这类ADC的临床联用策略提供了基础。在肠癌中，T moiety-exatecan ADC和DNA损伤通路的抑制剂联用显示出更好的肿瘤抑制效果。和PD-1联用，针对HER2的T moiety-exatecan ADC MTX-1000显示出比DS-8201a更强的协同效应。

除了“T moiety”连接子技术平台的独特优势之外，作为来自国内的工业界研究团队首次将尚未取得临床数据的原创ADC新药研究成果展现于癌症领域国际顶级期刊，还获益于以下具有亮点和特色的研究：

1、首次将喜树碱类毒素载荷及对应ADC药物进行了详尽和严谨的基础研究，包括从分子的设计理念、结构与机理特征、分子理化性质研究，拓展到耐药底物和机制研究、深入的药效学及毒性研究等。

2、通过大量的PDX模型实验以及前沿的类器官技术，加强临床转化研究的深度和广度；通过不同类型的药物毒性研究实验，进一步预测药物的有效性和安全性。

3、T moiety化学具体广泛的拓展性和应用场景。T moiety化学可以算作“click”化学，可以直接链接经典多肽连接子和多种不同作用机制的载荷分子。因此，T moiety可以用来构建双载荷的ADC分子，包括不同机理的细胞毒素或者免疫激动剂。

最后，论文作者特别指出，因为ADC是一个包括了生物和化学原件的整合体，需要全体系的设计和验证，包括连接子和载荷化学，ADC整体的分子作用机制，生物学和药理等。希望该研究的方法学可以为ADC领域提供一个标准和参考，持续提升ADC研究的高度和深度。