《癌症通讯》：川大华西医院团队开发低毒性TLR7激动剂脂质体，可辅助增强化疗抗癌效果！

肿瘤的放射治疗不仅能直接杀伤肿瘤细胞，还能通过释放肿瘤相关抗原和损伤相关分子模式（DAMPs）激活免疫反应。然而，放疗单独应用时，其诱导的全身性抗肿瘤免疫往往不足以实现长期疗效。

为提高放疗的免疫激活效果，近年来科学家积极探索放疗与免疫刺激剂的联合策略，通过增强免疫原性反应、提高肿瘤敏感性，有望在降低放疗剂量的同时提升治疗效果。

IV209-Cho-Lip是四川大学华西医院魏于全团队开发的一种胆固醇化TLR7激动剂脂质体。研究团队在最新的论文中提出，IV209-Cho-Lip与放疗联合可显著抑制肿瘤生长，延长小鼠生存期。

机制上，放疗能够诱导肿瘤细胞释放氧化线粒体DNA，激活树突状细胞的炎症小体通路，从而诱导白细胞介素1β（IL-1β）的成熟；同时，IV209-Cho-Lip通过TLR7-NF-κB信号通路促进树突状细胞成熟和IL-1β的前体表达。二者协同触发强烈的T细胞免疫应答。

这一策略不仅提高了放疗的免疫调节作用，还降低了TLR7激动剂的全身毒性，为临床联合治疗提供了新思路。论文于近日发表在《癌症通讯》期刊上[1]。

Toll样受体（TLRs）是一类重要的模式识别受体，能够识别病原体相关分子模式（PAMPs）以及损伤或死亡细胞释放的DAMPs，广泛表达于树突状细胞、巨噬细胞、NK细胞等免疫细胞和上皮细胞等非免疫细胞，通过激活NF-κB和MAPK信号通路，调控先天免疫并促进适应性免疫应答。

TLR激动剂被视为增强放疗诱导的免疫激活的潜在佐剂，例如一项I/II期临床试验显示，TLR9激动剂联合低剂量放疗可诱导惰性淋巴瘤患者的系统性抗肿瘤反应[2]。

TLR7作为内体膜定位的TLRs家族成员，其激动剂的临床应用长期受限于全身性炎症反应风险，目前仅局部用药咪喹莫特获批用于皮肤肿瘤治疗。为解决这一问题，魏于全团队开发了胆固醇化TLR7激动剂脂质体（1V209-Cho-Lip）[3]。该制剂通过脂质体修饰增强了淋巴结靶向性，降低全身毒性，并有效激活树突状细胞和CD8阳性T细胞。

1V209-Cho-Lip的机制[3]

在这项研究中，研究者们在乳腺癌和黑色素瘤小鼠模型（4T1和B16-F10）中评估了IV209-Cho-Lip与放疗的协同效应。当肿瘤体积达到约50 mm³时，小鼠接受单次8 Gy放疗，随后进行4次瘤内注射IV209-Cho-Lip（3 mg/kg），间隔三天进行一次。

结果显示，联合治疗组的肿瘤生长显著减缓，小鼠生存期明显延长，其中约33%的4T1荷瘤小鼠实现长期生存（>55天），而任意单药治疗组均未达到类似效果。进一步分析发现，联合治疗降低了肿瘤组织中的增殖标志物Ki67和微血管密度，提示其不仅抑制肿瘤生长，还影响了肿瘤微环境。

联合治疗效果更好

为了探究免疫调节机制，研究者们分析了肿瘤及引流淋巴结中的免疫细胞变化。

流式细胞术显示，联合治疗组中活化的CD8阳性T细胞和记忆性T细胞比例显著增加，同时树突状细胞的共刺激分子CD80、CD86表达上调，表明联合治疗促进了抗原呈递和T细胞活化。

体外实验验证了这一发现，用放疗条件培养基（R-TCM）和IV209-Cho-Lip刺激骨髓来源的树突状细胞（BMDCs）后，其成熟标志物CD40、CD80和促炎细胞因子IL-1β、IL-12、TNF-α分泌均显著增强。此外，当这些树突状细胞与抗原特异性T细胞共培养时，T细胞增殖和IFN-γ分泌明显增加，证实了联合治疗通过树突状细胞增强T细胞应答的能力。

接下来的研究揭示了两者通力合作的机制。

具体来说，IV209-Cho-Lip可以通过激活NF-κB通路，促进白细胞介素1β前体（pro-IL-1β）的表达。

而放疗那边，不仅能够直接杀伤肿瘤细胞，还会诱导线粒体损伤和活性氧（ROS）积累，导致肿瘤细胞释放氧化线粒体DNA（ox-mtDNA）。ox-mtDNA的释放作为损伤相关分子模式，可以激活树突状细胞内的NLRP3炎性小体通路，进而促进IL-1β的成熟和分泌。这样一来，放疗与IV209-Cho-Lip达成协同作用，共同促进树突状细胞的成熟并增强T细胞免疫应答。

机制

也就是说，放疗提供了“危险信号”ox-mtDNA，IV209-Cho-Lip则放大了免疫细胞的应答。其中，IL-1β是两者能够合作的枢纽。如果将编码IL-1β的基因敲除，再进行联合治疗，那么与野生型小鼠相比，基因敲除小鼠的肿瘤抑制效果显著减弱，且肿瘤微环境中活化T细胞和成熟树突状细胞的比例降低。

最后，研究评估了联合治疗的安全性。在乳腺癌小鼠模型中，治疗未引起小鼠体重显著变化，主要器官组织学检查未见异常，血清生化指标也无明显改变，证明该联合方案具有良好的安全性特征。

总体而言，这项研究为IV209-Cho-Lip与放疗的联合治疗的临床转化提供了重要的机制依据和安全保障，未来需进一步优化给药方案，并尝试结合免疫检查点抑制剂，或开发靶向递送系统以增强全身免疫应答。