Nature子刊：陈斯迪/叶露鹏团队利用体内AAV-睡美人CRISPR筛选技术，发现NK细胞癌症免疫治疗新靶点

耶鲁大学陈斯迪、南京大学叶露鹏等在 Nature Biotechnology 期刊发表了题为：In vivo AAV–SB-CRISPR screens of tumor-infiltrating primary NK cells identify genetic checkpoints of CAR-NK therapy 的研究论文。

研究团队历经多年的技术攻关，利用AAV-转座子系统将CRISPR文库整合到基因组中，克服了原代NK细胞转导和基因编辑效率低的障碍。研究通过四个平行的CRISPR筛选实验以及单细胞测序数据，发现了一个全新靶点——CALHM2，为NK细胞肿瘤免疫提供了新的治疗靶点。

在这项研究中，研究团队利用AAV-转座子技术高效整合CRISPR文库到原代NK细胞基因组中，并在四种不同的肿瘤模型中进行体内高通量基因筛选。同时，团队利用单细胞RNA测序（scRNA-seq）描绘肿瘤浸润NK细胞亚群和转录组图谱。

值得注意的是，两组实验发现了一个唯一共同的NK新靶点——CALHM2，敲除CALHM2的NK细胞具有更强的杀伤性和肿瘤浸润能力，CALHM2的mRNA能够逆转CALHM2敲除的NK细胞的表型。在人原代NK细胞中，CALHM2敲除增强了它们的细胞毒性、脱颗粒和细胞因子的产生。在对CAR-NK细胞具有抵抗力的实体瘤模型中，CALHM2敲除的CAR-NK细胞在体内显示出强大的抗肿瘤效果。

总的来说，该研究发现了一个NK细胞的全新检查点——CALHM2，并展示了通过敲除CALHM2来构建增强型NK细胞疗法的潜力。

耶鲁大学陈斯迪教授团队专注于开发新型基因编辑工具、CRISPR筛选技术以及分子和细胞工程，旨在为遗传和肿瘤免疫等重大健康和疾病领域寻找新的治疗靶点和疗法。陈斯迪教授及其前博士后叶露鹏（现为南京大学现代生物研究院教授）为该论文通讯作者，陈斯迪团队博士后彭磊和Paul Renaur为该论文共同第一作者。