Molecular Therapy: Nucleic Acids！PPMO介导的外显子跳跃是恢复肌营养不良蛋白的有前景的治疗策略

杜氏肌营养不良症(DMD)是一种严重的进行性肌肉萎缩疾病，由于X染色体DMD基因突变导致dystrophin表达丧失，全球约1：5,000活男婴受到影响。在健康的骨骼肌和心肌中，肌营养不良蛋白在收缩和松弛过程中对肌膜的稳定性起着关键作用。

在DMD中，肌营养不良蛋白的缺乏会导致肌肉退化和炎症，进而导致运动功能丧失，最终导致心肺功能下降。

图片来源：https://doi.org/10.1016/j.omtn.2022.10.025.

近日，来自美国全国儿童医院的研究者们在Molecular Therapy: Nucleic Acids杂志上发表了题为“Systemic PPMO-mediated dystrophin expression in the Dup2 mouse model of Duchenne muscular dystrophy”的文章，该研究发现表明，PPMO介导的外显子跳跃是一种在外显子2重复的情况下恢复肌营养不良蛋白的有前景的治疗策略。

Duchenne肌营养不良症(DMD)是一种破坏性的肌肉萎缩疾病，由于dystrophin表达的丧失而引起，导致运动和心肺功能的进行性丧失。FDA已经批准了四种使用反义磷二酰吗啉低聚物(PMOS)的外显子跳过方法来恢复DMD开放阅读框架，导致功能上但内部缺失的肌营养不良蛋白的表达，但在单外显子重复的患者中，外显子跳过有可能恢复全长肌营养不良蛋白的表达。

细胞穿透性多肽结合的PMOS(PPMOs)比未结合的PMOS具有更强的细胞摄取能力和更有效的抗肌营养不良蛋白修复能力。在目前的研究中，研究者证明了在Dup2小鼠模型中广泛存在的PPMO介导的Dstrophin修复外显子2复制，代表了DMD患者中最常见的单外显子复制。

在这项概念验证研究中，一次静脉注射针对外显子2剪接受体位置的PPMO在注射后15天诱导Dup2骨骼肌中45%至68%的外显子2跳过DMD转录本。免疫荧光法显示肌营养不良蛋白在治疗后15~30天的平均阳性纤维数为77%~87%，平均信号强度为正常的41%~51%，免疫印迹法为15.7%~56.8%。

PPMO-A治疗后肌肉中肌营养不良蛋白的免疫荧光强度

图片来源：https://doi.org/10.1016/j.omtn.2022.10.025.

综上所述，本研究结果表明，在第二外显子重复的情况下，PPMO-A的全身给药显示出作为治疗剂的显著前景，从而显著挽救了骨骼肌中的肌营养不良蛋白。动物健康监测没有显示PPMO治疗后的任何临床毒性迹象，除了由于自发的第二次DMD突变而被排除外，没有小鼠在研究过程中丢失。

尽管这项研究不是为了评估安全性而设计的，但没有任何毒性迹象表明，与先前发表的跳过外显子23的MDX小鼠研究中使用的早期PPMO相比，所描述的PPMO-A可能具有更好的安全性。

最近的工作也证明了PPMO在MDX小鼠中的耐受性良好，高达80 mg/kg，证实了类似PPMO的相对安全性。对于外显子2跳过，进一步确认安全性，确定改善肌肉功能和心脏疗效的最佳剂量和给药方法，将为未来的临床开发提供重要的基础。（生物谷 Bioon.com）

参考文献

Liubov V. Gushchina et al. Systemic PPMO-mediated dystrophin expression in the Dup2 mouse model of Duchenne muscular dystrophy. Mol Ther Nucleic Acids. 2022 Nov 9;30:479-492. doi: 10.1016/j.omtn.2022.10.025