STTT：LIX1样蛋白通过驱动肝星状细胞活化，促进肝纤维化

肝星状细胞(HSC)在纤维化反应中发挥关键作用，因此灭活活化的HSC可能是一种潜在的纤维化治疗方法。由 HSC 和巨噬细胞表达的 CCL20 可作为炎症和纤维化的介质。LIX1L 是一种推定的 RNA 结合蛋白 (RBP)，可能在转录后基因调控中起重要作用。然而，LIX1L在肝纤维化中的生物学功能尚不清楚，因此作者旨在研究其在HSC激活和肝纤维化中的功能。

图片来源：https://doi.org/10.1038/s41392-021-00665-6

LIX1L在人肝硬化(GSE25097)、肿瘤组织和纤维化肝患者中表达显著上调，并与肝硬化肝纤维化分期、炎症水平和α-SMA表达呈正相关。同样，LIX1L在CCl4或BDL诱导的小鼠肝纤维化模型中表达明显增加。

该实验首先生成 Lix1l 敲除 (Lix1l / ) 小鼠，然后对其进行 CCl4 和 BDL 处理。H&E染色、Masson三色染色、Sirius红染色及生化胶原定量结果显示Lix1l /小鼠的胶原沉积减少，假小叶结节形成。与WT小鼠相比，Lix1l /小鼠血清ALT、AST、促炎基因和α-SMA蛋白表达显著降低。

HSC和KC的活化在肝纤维化过程中起重要作用。通过α-SMA和F4/80表达表明，Lix1l /小鼠的HSC和肝巨噬细胞浸润的纤维化活性降低。为了确定LIX1L的细胞分布，作者检测了LIX1L在培养的原代造血干细胞、KCs和肝细胞中的表达。从健康、CCl4和BDL处理小鼠中分离的原代细胞显示LIX1L在造血干细胞和KCs中比在肝细胞中更丰富。肝组织双重免疫荧光染色显示LIX1L与α- sma阳性的造血干细胞和f4 /80阳性的巨噬细胞共定位。为了证实这些结果，作者使用腺相关病毒(AAV)-LIX1L-Flag在LIX1L敲除小鼠的肝细胞中表达LIX1L。

值得注意的是，LIX1L在肝细胞中过表达未能逆转LIX1L敲除对纤维化的有益作用，表明LIX1L在HSC和KCs中主要调节肝纤维化。

肝星状细胞活化是肝纤维化发展的关键事件。作者检测了LIX1L的增加是否调节HSC的激活，发现在培养激活过程中，随着α-SMA的诱导，原代HSC中LIX1L水平逐渐升高。LIX1L缺失抑制了原代造血干细胞和LX-2细胞中纤维化标志物的表达，抑制了CCl4刺激小鼠中HSC的激活，而LIX1L过表达进一步增强了LX-2细胞中α-SMA和纤维化标志物的表达。总之，这些结果表明LIX1L促进肝纤维化，参与调节HSC激活。

为了确定LIX1L诱导HSC激活的机制，作者比较了对照和LIX1L敲低LX-2细胞的基因表达谱。结果表明，LIX1L 敲低降低了已知在 HSC 活化和肝纤维化中起关键作用的多种基因的表达。KEGG通路分析显示，LIX1L基因下调抑制的基因在趋化因子信号通路中富集最多。同时，CCL20和CCL2的表达明显减少，其中CCL20的表达减少最多。在 LIX1L 缺陷型 HSCs 和 KCs 以及从 BDL 处理的小鼠中分离的培养的原代 HSCs 和 KCs 的上清液中，通过 Elisa 测定法测定的 Ccl20 mRNA 和 CCL20 表达显着降低。

免疫组化分析显示，CCL20染色主要发生在非实质细胞中，而CCl4或BDL处理Lix1l /小鼠中CCL20染色减少。此外，CCL20敲低显著降低了LX2细胞纤维化基因的表达。CCL20可激活HSC，逆转LIX1L缺失对HSC激活的抑制作用。此外，外源CCL20可上调HSCs和KCs中Lix1l的表达。与 WT KCs 相比，Lix1l/KCs 中的内源性 CCL20 表达降低。因此，为了确定内源性CCL20是否影响LIX1L的表达，作者检测了LIX1L / KCs和WT KCs共培养的原代造血干细胞中LIX1L的表达。发现内源性CCL20可以上调LIX1L的表达。这些数据进一步表明LIX1L通过调控CCL20信号通路促进HSC的活化。

LIX1L通过调节CCL20表达促进肝纤维化的示意图

图片来源：https://doi.org/10.1038/s41392-021-00665-6

该研究证实LIX1L是一种通过激活造血干细胞介导慢性肝损伤过程中肝纤维化的新型调控因子。LIX1L与CCL20 mRNA的相互作用是连接CCL20- ccr6轴、KCs-HSCs通讯以及HSCs激活的关键分子事件。因此，LIX1L抑制可能是一种有前景的预防肝纤维化的策略。（生物谷 Bioon.com）

参考文献

Xiaoyun Zhu et al. LIX1-like protein drives hepatic stellate cell activation to promote liver fibrosis by regulation of chemokine mRNA stability. Signal Transduct Target Ther 2021 Sep 1;6(1):319. doi: 10.1038/s41392-021-00665-6.