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实验性矽肺大鼠肺泡灌洗液中巨噬细胞和白介素6的变化及意义

来源:中国知网 2013-04-17 18:15

背景

目前尘肺病仍是我国最严重的职业病,矽肺和煤工尘肺占尘肺病例的90%以上。矽肺确切的发病机制至今不明,一般认为巨噬细胞与矽尘(SiO2)颗粒相互作用而产生多种细胞因子在矽肺发生发展过程中起到关键性作用。当矽尘颗粒(直径在0.5~5μm)经呼吸道进入肺泡之后,就被肺内巨噬细胞吞噬清除,吞噬了大量石英粉尘的巨噬细胞会崩解坏死,再被其他巨噬细胞吞噬,形成恶性循环,持续破坏肺组织。吞噬了石英粉尘的巨噬细胞释放多种细胞因子,与其他不同类型细胞产生的细胞因子通过自分泌和旁分泌的途径,促进成纤维细胞生长和胶原形成,最终导致矽肺结节的形成。

本实验通过用二氧化硅(SiO2)悬液气管灌注大鼠建立实验性矽肺大鼠模型,收集支气管肺泡灌洗液(BronchoalveolarLavage Fluid, BALF),观察其细胞涂片的改变,计数有核细胞总数和巨噬细胞百分比,检测其中细胞因子白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的表达变化情况,监测核因子-κB(NF-κB)在矽肺模型组和对照组大鼠肺组织中的表达,探讨在矽肺发病机制中的可能作用。

目的

阐明一次性染尘后实验性矽肺大鼠肺巨噬细胞在矽肺形成过程中所起的作用,初步研究实验性矽肺大鼠在染尘后不同时间支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞与IL-6和IL-8的动态变化,并探讨其意义。

方法

将54只健康雄性SD大鼠随机分为模型组27只、对照组27只。

模型组以非暴露方式一次性气管内注入1ml二氧化硅悬液(40g/L)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入等量的灭菌生理盐水。分别在染尘后第1,7,14,21,28,35,77,106,126天处死各组大鼠各3只,收集肺泡灌洗液和肺组织,用免疫组化SP法观察肺组织中NF-κB的表达情况;ELISA法检测BALF中IL-6和IL-8的含量;并计数有核细胞总数和巨噬细胞百分比。

结果

模型组大鼠BALF中IL-6的浓度在早期(第1,7,14天)均比对照组高,第7天下降,第14天最高,差异有统计学意义(P<0.05),其后下降到低位,后期有所回升,差异无统计学意义。IL-8的浓度变化与IL-6趋势相同,但差异均无统计学意义。染尘大鼠有核细胞计数和巨噬细胞百分比计数均比对照组大鼠的高,差异均有统计学意义(P<0.05)。有核细胞计数在第14天增高并在后期(第77,106,126天)直线上升;巨噬细胞百分比计数在第14天和第126天达到峰值。肺组织中NF-κB的表达在第1,7,14天与第77,106,126天时明显增加,有统计学意义(P<0.01),第21,28,35天时,没有显著差异,模型组均高于对照组。

结论

肺泡巨噬细胞在接触硅尘后变化和分泌炎症因子与矽肺的发生发展有密切关系。

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