Cell：CRISPR体内筛选平台揭示17个抗流感宿主基因——RGNEF和LASP1各显神通

甲型流感病毒是引起季节性流感和全球大流行的主要病原体。病毒进入宿主细胞后，高度依赖宿主细胞的多种蛋白来完成其复制周期，包括病毒吸附、内吞、核内释放、转录复制、组装和出芽。这些被病毒“劫持”的宿主蛋白称为宿主因子。理论上，靶向宿主因子可以产生广谱抗病毒效果，且不易诱导病毒耐药性。

在病毒学研究中，在完整动物模型中对宿主因子进行功能验证始终是一个重大瓶颈。大量体外研究（如细胞系中的siRNA筛选）发现了众多可能参与病毒复制的宿主蛋白，但将这些发现转化为对病毒感染周期和致病机制的深入理解，往往因缺乏便捷、可靠的体内验证手段而受阻。

为攻克这一难题，一个国际研究团队构建了一套系统性的体内筛选平台，专门用于甲型流感病毒研究。该平台包含一个由84种经CRISPR-Cas9基因编辑技术构建的小鼠品系组成的文库，靶向的宿主基因均来自文献报道和体外siRNA筛选的候选列表。

利用这一资源，研究团队成功鉴定出17个宿主基因，当这些基因被敲除后，小鼠表现出对甲型流感病毒感染的显著抗性。进一步针对其中两个基因——Arhgef28（编码蛋白RGNEF） 和 Lasp1的深入研究表明，它们通过截然不同的机制保护宿主：（1）RGNEF缺失：通过抑制病毒在肺部的复制，直接减少病毒载量，从而减轻病理损伤；（2）Lasp1修饰：则通过不依赖病毒复制的途径增强宿主抵抗力，可能涉及调节免疫应答或组织修复。

传统的宿主因子研究主要依赖体外培养的细胞系，但细胞系无法反映完整生物体内的复杂环境，如免疫系统应答、组织屏障、代谢状态等。CRISPR-Cas9技术使科学家能够直接在活体动物中敲除特定基因，并观察其对病毒感染的影响，大大提高了筛选结果的可靠性和转化潜力。