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  • 重组蛋白和多肽的分离纯化(4)

    2.2.2.1 选择亲和标签时需要考虑的因素 1. 亲和标签是否会影响到目标蛋白的结构和功能 亲和标签与目标蛋白之间的作用是相互的,需要综合的考虑,既要考虑到对目标蛋白结构功能的影响,又要考虑到对标签与其配体亲和作用的影响,以及实际的用途。

  • 重组蛋白和多肽的分离纯化(3)

    2.2.1 层析技术在分离纯化中的应用 层析技术应用于蛋白质的分离纯化开始于60年代,现在已成为蛋白质分离纯化的高分辨的方法。在层析技术的发展过程中,首先是基质填料的发展。

  • 重组蛋白和多肽的分离纯化(2)

    1. 分离纯化的方法策略及其应用 下游的分离纯化步骤不仅要在可替换的分离技术间进行选择,如细胞的破碎可选择高压匀浆法、高速珠磨法、超声破碎或酶溶法,分离细胞、细胞碎片、包涵体和沉淀物,可选择离心或过滤,需要进行浓缩的时候,可选择沉淀或超滤;另一方面,设计的纯化工艺包括特定的层析步骤,及层析的先后顺序,以期得到最大的得率。

  • 重组蛋白和多肽的分离纯化(1)概述

    1. 概述 分离纯化组成了基因工程的下游处理(downstream processing)阶段,这一过程又和上游过程紧密相联系,上游过程的诸方面影响到下游的分离纯化,所以在进行目标蛋白质表达纯化时要统一考虑和整体设计,并充分考虑上游因素对下游的影响,如是否带有亲和标签,是否进行分泌表达。