专访张毅教授：滋养细胞法体外大规模扩增制备NK细胞

1、CAR-T对血液性肿瘤如白血病等具有较好的治疗效果，但是CAR-T细胞输注后，有一定的概率产生细胞因子释放综合征和神经毒性这两类较为严重的毒副作用。

2、另外，尽管CAR-T细胞治疗完全缓解率高，然而由于CAR-T细胞存在细胞耗竭的问题，部分获得缓解的患者可能在几年内表现出疾病复发，此外由于存在脱靶现象，目前对于实体瘤的治疗还是比较乏力。

3、最后一点就是因为新药的上市需要经过药学、毒理学、药代动力学和临床研究等，研发的投入是非常高昂的，所以产品的价格也是非常的高，对于普通患者来说可能还是不可承担的，希望能早日列入国家医保。

非特异性免疫细胞创新药主要以NK细胞为代表。由于NKG2D和CD244增加了NK细胞的毒性能力和细胞因子的产生，所以从一定程度上来讲，基于NK细胞制备的CAR-NK具有较好的杀瘤效果。另外的话，NK细胞不需要经过预先刺激就可以起作用，反应速度更快。此外，NK细胞通常不介导发生GVHD，所以CAR-NK细胞的安全性也高，再加上NK细胞来源丰富，外周血、脐血、人类胚胎干细胞、诱导多功能干细胞甚至是NK-92细胞系，因此可以做为现货型免疫细胞的首选之一。当然，CAR-NK细胞同样存在着一些局限性，比如NK细胞的免疫记忆问题还需要进一步研究，而且要在治疗中保持CAR-NK细胞足够的效力，可能需要多次的回输，因此必须要有足够数量的高纯度高活性的效应细胞，而如何得到足够的优质效应细胞是其最核心的难点之一。

张教授：如何在体外得到足够的优质效应细胞是其最核心的难点之一。NK细胞体外制备主要有4个方面的要求，包含细胞扩增数量、NK细胞纯度、表达受体以及NK细胞的杀伤性。其中细胞扩增数量是主要问题。去年浙江杭州有家企业就NK细胞体外扩增的质量标准提交了“浙江制造标准”的申报并且已经被成功立项，该标准一旦发布将成为NK细胞体外扩增第一个省级地方标准，据悉这家企业正在联合另外其它企业共同申报国家级的团体标准，这无疑对于整个细胞创新药行业都是一个令人振奋的好消息。

回到刚刚的问题。原代NK细胞的体外培养形式多样，但是大体可分为细胞因子法和滋养细胞法。细胞因子法最大的优势就是其成分相对清晰，在政策监管上相对较为容易，但是难以实现NK细胞的快速扩增，而且稳定性较差。

根据目前的研究表明，滋养细胞法能实现NK细胞的快速扩增，得到高纯度高质量的NK细胞，具有良好的稳定性，纯度高，扩增快，这是纯因子法无法比拟的，但是因为滋养细胞本身是一种细胞，成分相对复杂，政策监管上相对困难。

说到这里也分享一个好消息，那就是CDE在2022年曾发布《免疫细胞治疗产品药学研究与评价技术指导原则》试行版，这里面对滋养细胞做了一个定位，为原材料中的生产辅助细胞。