生物酶工程

将酶或者微生物细胞,动植物细胞,细胞器等在一定的生物反应装置中,利用酶所具有的生物催化功能,借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活中。

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Taq酶中的“超级英雄”

来源:生物谷 2017-09-20 16:56

从1983年Kary Mullis提出聚合酶连锁反应方法至今已超过30年,PCR反应在实验室中获得了指数级别的发展,为分子生物学带来革命性的推进,并且这个革命仍在继续爆发,丝毫没有放缓的迹象。随着PCR应用越来越多样化,意味着研究者对于Taq酶功能的需求也越来越多样化,一“酶”走天下的时代已一去不返。

当下分子生物学试剂市场基本上都是野生型的DNA聚合酶。随着客户实验要求的提升和生物样本复杂性的提高,野生型DNA聚合酶的局限性在许多实验中也逐渐凸显出来,如扩增效率低、特异性差、高AT或GC含量样本扩增结果差、样本中或PCR系统中的有些抑制剂对反应有干扰等。

KAPA Biosystems专有的直接分子进化平台是一种高度可定制的蛋白质工程技术,能够产生并筛选大量的酶突变体。野生型DNA聚合酶基因经过多轮的突变、筛选和扩增,最终获得需要的优异特性,它们是Taq酶中的“超级英雄”:
·   对于模板中含有常见的PCR反应抑制物如粪便样品等,KAPA2G Robust DNA聚合酶强健的合成力可以获得更稳定的结果。
·   对PCR速度有高要求的话,KAPA2G Fast DNA聚合酶延伸速度高达1s/kb,并且具有高灵敏度、高特异性的特性。较传统PCR反应可以节省大约75%的时间。
·   如果对qPCR实验的灵敏度和速度有要求,KAPA SYBR FAST qPCR KITS中的Taq酶提高了对荧光染料的耐受性,可大大提高信号强度及反应的有效性。


下面就让我们见识一下这些“超级英雄”的真正实力吧!

   
【快如一道闪电】

   
KAPA2G Fast DNA 聚合酶
通过野生型Taq酶改造的第二代工程酶,具有更高的合成能力和合成速度。
√   反应更快:PCR反应时间缩短75%。
√   合成能力更强:延伸时间缩短至1 sec/kb。
√   兼容更广:兼容多种实验样本,甚至富含AT-和GC-的样本。
√   灵敏度及产量更高

  
KAPA2G快速DNA聚合酶应用方案:小鼠基因型快速鉴定
KAPA2G快速DNA聚合酶每秒钟扩增1kb的超凡速度可以在各个研究领域中发光发热,例如用于小鼠基因型快速鉴定:

  
快速的样本抽提+最快速KAPA2G DNA聚合酶,从样本到结果,轻松实现1小时鉴定小鼠基因型!

  
KAPA2G快速DNA聚合酶扩展阅读:
Stopped-flow DNA polymerase assay by continuous monitoring of dNTP incorporation by fluorescence
·   停流DNA聚合酶反应(Stopped-flow DNA polymerase assay)通过荧光染料实时监测dNTP的插入情况,证明KAPA2G快速DNA聚合酶是目前市场上最快速的聚合酶!
·   KAPA2G快速DNA聚合酶配合硬件实现的近瞬时加热冷却,三分钟完成30个循环PCR反应,难以想象的快捷!

  
【强健看得见】

   
做过多年实验的你已经深深体会到实验就像人生一样总是无法完美:
·   做了很多努力,DNA模板仍然无法完全去除抑制成分
·   模板序列GC或AT含量过高,你无法控制
·   不同来源、不同GC含量的多个DNA模板无法使用相同的PCR方案
但就如人生需要低头奋力前行,实验也需要不懈努力,还好有强健的KAPA2G Robust DNA聚合酶帮你分担,共同克服这些PCR实验条件的不完美。

  
KAPA2G Robust DNA聚合酶
基于野生型Taq酶进化改造的第二代工程酶,用于解决广泛扩增子类型(富含GC或AT)不一致的扩增问题。适合于挑战性的PCR应用和困难样本的扩增,显著降低尝试多种酶带来的高消费和不断优化扩增方案浪费的时间。
√   合成能力强:耐受PCR体系中的抑制成分,兼容多种实验样本。优化粗制样本、FFPE样本、富含AT-和GC-样本、菌落PCR反应。
√   延伸速度比野生型Taq酶更快:延伸时间缩短至15-30 sec/Kb,帮助实验者更快的获得结果。
√   灵敏度和产量更高:对于样本量有限或模板含量低的实验尤其适用。


  
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