研究为治疗非酒精性脂肪肝炎导致的肝癌提供新策略

近日，中山大学附属第一医院精准医学研究院名誉院长于君教授团队研究成果“Targeting N6-methyladenosine reader YTHDF1 with siRNA boosts anti-tumor immunity in NASH-HCC by inhibiting EZH2-IL-6 axis”发表于肝脏疾病领域顶级期刊Journal of Hepatology 杂志。该研究首次揭示了YTHDF1在非酒精性脂肪肝炎导致的肝细胞癌（NASH-HCC）中的功能作用、分子机制及其与肿瘤免疫微环境的相互作用，为改善NASH-HCC抗PD-1耐药提供了联合治疗新策略。

肝细胞癌(HCC)是世界上第六大最常诊断的癌症，也是第三大癌症死亡原因。非酒精性脂肪肝炎(NASH)是指除酒精和其他明确的肝损因素之外导致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征，与肥胖、胰岛素抵抗和高脂血症有关，最终可能发展为肝纤维化、肝硬化和肝癌。随着生活水平的提高，NASH相关的肝癌(NASH-HCC)占肝癌患者的比例也越来越高。

然而，NASH-HCC的发生机制尚不清楚，缺乏有效的靶向药物对NASH-HCC进行治疗。目前为止，临床尚未有NASH-HCC的药物或者生物疗法。利用单克隆抗体靶向免疫检查点阻断（ICB）已成为HCC的一种新兴治疗手段，然而NASH-HCC对ICB治疗没有响应，因此亟需探究NASH-HCC对ICB治疗耐药的原因，寻找NASH-HCC潜在的治疗靶点，从而克服NASH-HCC对ICB治疗耐药。

m6A是真核mRNA中最丰富的化学修饰，参与调节RNA的稳定性、核加工、转运、定位、翻译，它和RNA-蛋白相互作用来调节RNA的命运。YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1 (YTHDF1) 是RNA m6A修饰的“阅读器”蛋白，可以通过YTH结构域特异性的识别RNA上m6A修饰的位点，促进核糖体附着在含有m6A修饰的mRNA上。然而对于YTHDF1在HCC，特别是NASH-HCC的发病机制中的作用，以及对肿瘤免疫微环境的调节功能，目前还知之甚少。

该研究发现YTHDF1在NASH-HCC患者肿瘤组织中相较于肿瘤周围组织显著升高。利用Ythdf1肝脏特异性过表达小鼠以及饮食模型诱导的NASH-HCC自发成瘤模型，该研究发现Ythdf1可以促进NASH-HCC的发生和发展。RNA seq 结果提示Ythdf1主要影响免疫系统相关信号通路，sc-RNA seq 和流式分析结果显示Ythdf1诱导髓源性抑制细胞（MDSCs）的积累并抑制细胞毒性CD8+T 细胞的功能。

MDSCs的募集和功能主要受到细胞因子的调控，为了研究Ythdf1如何影响MDSCs的功能，该研究通过细胞因子ELISA array 结合肿瘤细胞与免疫细胞体外共培养实验发现Ythdf1通过诱导IL-6的分泌，介导MDSCs的募集和激活，导致细胞毒性CD8+T 细胞功能障碍。通m6A-seq，RIP-seq，ribo-seq和蛋白质组等多组学研究鉴定出EZH2 mRNA 是YTHDF1的关键下游靶点。YTHDF1识别EZH2 mRNA 上m6A修饰位点促进EZH2的翻译，EZH2进一步促进IL-6的表达和分泌。LNP包裹siRNA治疗是FDA批准的可用于临床治疗的方案，LNP-siRNA或者Ythdf1基因敲除靶向Ythdf1联合anti-PD-1治疗可显著提高NASH-HCC肿瘤对ICB治疗的敏感性。

该研究首次发现YTHDF1-EZH2-IL-6信号轴可以招募和激活MDSCs，导致细胞毒性CD8+T细胞功能障碍，从而促进NASH-HCC的发生和发展。靶向YTHDF1可以提高NASH-HCC抗anti-PD1免疫治疗应答新靶点。

YTHDF1-EZH2-IL-6信号轴促进NASH-HCC示意图

中山大学附属第一医院精准医学研究院名誉院长于君教授为该论文通讯作者，特聘副研究员王莉娜为第一作者。